[发明专利]抗神经毡蛋白抗体及使用方法

说明书

相关申请

本申请要求2010年7月9日提交的美国临时专利申请No.61/363,121的权益，通过提及而将其公开内容收入本文用于所有目的。

发明领域

本发明涉及抗神经毡蛋白抗体及其使用方法。

发明背景

神经毡蛋白1(NRP1)是一种有助于神经和血管系统发育的多功能受体。NRP1最初描述为结合脑信号蛋白3A配体的受体，与丛蛋白共同受体一起起作用来调节轴突导向(He and Tessier-Lavigne,Cell(1997)90:739-51)。后来显示了NRP1还结合血管内皮生长因子(VEGF)配体家族的成员来介导血管发育(Soker et al.,Cell(1998)92:735-45;Kawasaki et al.,Development(1999)126:4895-902)。另外，数项研究提出NRP1通过调节血管和/或肿瘤细胞功能在肿瘤生物学中的作用(Bielenberg et al.,Exp Cell Res(2006)312:584-93)。

Pan et al.,J Biol Chem(2007)282:24049-56显示了一种结合NRP1的单克隆抗体在体外降低VEGF介导的内皮细胞迁移(还可参见PCT公开文本No.WO2007/056470)。在体内阻断VEGF与NRP1的相互作用降低血管发生和血管重构。该抗NRP1抗体作为单一药剂减缓肿瘤生长；提出这是由于抗NRP1抗体介导的对经由一种VEGF依赖性过程的血管萌芽的降低。该抗NRP1抗体增强用抗VEGF抗体进行的VEGF阻断的抗血管发生和抗肿瘤效果。数据提示通过用抗NRP1降低血管重构，脉管有可能保留更加未成熟的表型。因为认为未成熟脉管是更加VEGF依赖性的，所以抗NRP1处理的肿瘤中的血管可变得对抗VEGF疗法更加易感，如此在组合这两种疗法时在肿瘤模型中导致组合功效(Pan et al.,Cancer Cell(2007)11:53-67)。鉴于NRP1在血管发生中的作用，需要其它的检测NRP1的存在的工具。

发明概述

本发明提供抗NRP1抗体及其使用方法。在一个实施方案中，本发明提供一种结合神经毡蛋白-1(NRP1)的分离的抗体，其中该抗体包含：(a)HVR-H1，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:3；(b)HVR-H2，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:4；和(c)HVR-H3，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:5。在某些实施方案中，该抗体，进一步包含：(a)HVR-L1，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:8；(b)HVR-L2，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:9；和(c)HVR-L3，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:10。

还提供一种分离的结合神经毡蛋白-1(NRP1)的抗体，其中该抗体包含：(a)HVR-L1，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:8；(b)HVR-L2，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:9；和(c)HVR-L3，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:10。

在另一个实施方案中，本发明提供一种结合神经毡蛋白-1(NRP1)的分离的抗体，其中该抗体包含：(a)VH序列，其与氨基酸序列SEQ ID NO:2具有至少95%序列同一性；(b)VL序列，其与氨基酸序列SEQ ID NO:7具有至少95%序列同一性；或(c)(a)中的VH序列和(b)中的VL序列。在一些实施方案中，该抗体包含VH序列SEQ ID NO:2。在某些实施方案中，该抗体包含VL序列SEQ ID NO:7。还提供一种结合神经毡蛋白-1(NRP1)的分离的抗体，其中该抗体包含VH序列SEQ ID NO:2和VL序列SEQ ID NO:7。

在某些实施方案中，本发明的抗体为IgG1抗体。在一些实施方案中，该抗体为结合神经毡蛋白的抗体片段，例如缺少Fc部分的抗体、F(ab’)₂、Fab、或Fv结构。另一方面，本发明提供包含任何本发明抗体的免疫偶联物。

本发明还提供编码任何本发明抗NRP1抗体的分离的核酸。在一个实施方案中，提供包含该核酸的载体。在一个实施方案中，提供包含该载体或包含该核酸的宿主细胞。在一个实施方案中，该宿主细胞为真核的。在一个实施方案中，该宿主细胞为CHO细胞。在一个实施方案中，提供一种生成抗NRP1抗体的方法，其中该方法包括在适合于表达编码该抗体的核酸的条件下培养该宿主细胞从而生成抗体。在一些实施方案中，该方法进一步包括分离通过该方法生成的抗体。