[发明专利]用于检测李斯特氏菌的寡核苷酸及其应用

说明书

本申请要求在2010年8月30日提交的第61/378,072号美国临时专利申请的权益，通过引用将该美国临时专利申请的全部内容包含于此。

技术领域

公开了用于检测李斯特氏菌（Listeria spp.）的寡核苷酸组和试剂盒以及通过使用该寡核苷酸组和试剂盒检测样品中李斯特氏菌的方法。

背景技术

李斯特氏菌（Listeria spp.）的细菌为革兰氏阳性、无芽孢且为运动杆菌，并且可以在大约-4℃至大约45℃的宽的温度范围内以及大约≤5.5至大约9.5的宽的pH范围内生长。李斯特氏菌属（Listeria genus）包含六个种，包括Listeria monocytogenes（单核细胞增生性李斯特氏菌）、L.innocua（英诺克李斯特氏菌）、L.welshimeri（威尔斯李斯特氏菌）、L.seeligeri（西尔李斯特氏菌）、L.ivanovii（伊氏李斯特氏菌）和L.grayi（格氏李斯特氏菌）。在李斯特氏菌的这些种中，L.monocytogenes是大部分人类李斯特氏菌病病例的病源。免疫力低下者、孕妇、老年人、新生儿易被这些种感染。李斯特氏菌病的典型症状包括败血病、脑膜炎和流产。

食用被污染的食物是李斯特氏菌感染的主要原因。已经存在由食用诸如未经高温消毒的牛奶、污染的奶酪、凉拌卷心菜等污染的食物导致的各种由李斯特氏菌引起的感染的流行病。

因此，日益需要快速、灵敏并准确地检测诸如食物、表面拭样（surface wipe）或医学样品的样品中的李斯特氏菌的方法。

发明内容

技术问题

总结

公开了一种适于快速、灵敏并准确地检测李斯特氏菌的组合物。组合物包括：第一寡核苷酸，序列为SEQ ID NO:19：X₁CCAAGCAGTGAGTGTGAGAAX₂（SEQ ID NO:19），其中，位置1处的X₁是T或者空缺，位置22处的X₂是G或者空缺；以及第二寡核苷酸，序列为SEQ ID NO:20：X₁X₁GACAGCGTGAAATCAGGX₃X₃X₄（SEQ ID NO:20），其中，位置1和2处的X₁均为T或者空缺，位置20和21处的X₃是A或者空缺，位置22处的X₄是C或空缺。

在一个实施例中，SEQ ID NO:19的第一寡核苷酸中的核苷酸残基的数目可以是20或21，SEQ ID NO:20的第二寡核苷酸中的核苷酸残基的数目是18-21。

在另一个实施例中，第一寡核苷酸是从SEQ ID NO:1-3：CCAAGCAGTGAGTGTGAGAAG（SEQ ID NO:1）、CCAAGCAGTGAGTGTGAGAA（SEQ ID NO:2）和TCCAAGCAGTGAGTGTGAGAA（SEQ ID NO:3）的寡核苷酸的组中选择的一种或多种。

在实施例中，第二寡核苷酸是从SEQ ID NO:5-9：TGACAGCGTGAAATCAGGAAC（SEQ ID NO:5）、TTGACAGCGTGAAATCAGG（SEQ ID NO:6）、TGACAGCGTGAAATCAGGA（SEQ ID NO:7）、TGACAGCGTGAAATCAGGA（SEQ ID NO:8）和GACAGCGTGAAATCAGGA（SEQ ID NO:9）的寡核苷酸的组中选择的一种或多种。