[发明专利]赋予针对RAF和MEK抑制剂的抗性的MEK1突变

权利要求书

1.一种编码具有MEK1活性的突变型MEK1蛋白质的分离核酸分子，其中所述突变型MEK1蛋白质包含在SEQ ID NO：2中所示的野生型MEK1的位置121上的氨基酸置换，该氨基酸置换对表达该突变型MEK1蛋白质的细胞赋予针对一种或多种RAF或MEK抑制剂的抗性。

2.权利要求1的核酸分子，其中该RAF抑制剂选自PLX4720、PLX4032、BAY 43-9006（索拉非尼）、ZM 336372、RAF 265、AAL-881、LBT-613和CJS352。

3.权利要求1的核酸分子，其中该MEK抑制剂选自CI-1040、AZD6244、PD318088、PD98059、PD334581、RDEA119、化合物A和化合物B。

4.权利要求1的核酸分子，其中该氨基酸置换是121C>S氨基酸置换。

5.权利要求1的核酸分子，其中该突变型MEK1蛋白质包含SEQ ID NO：4的氨基酸序列。

6.权利要求1的核酸分子，其包含SEQ ID NO：3的核苷酸序列。

7.一种表达载体，其包含权利要求1-6中任一项的核酸。

8.一种宿主细胞，其包含权利要求7的表达载体。

9.一种产生突变型MEK1蛋白质的方法，其包括培养权利要求8的宿主细胞，从而使得该细胞产生突变型MEK1蛋白质。

10.一种具有MEK1活性的分离的突变型MEK1蛋白质，其中所述突变型MEK1蛋白质包含在SEQ ID NO：2中所示的野生型MEK1蛋白质的位置121上的氨基酸置换，该氨基酸置换对表达该突变型MEK1蛋白质的细胞赋予针对一种或多种RAF或MEK抑制剂的抗性。

11.权利要求10的突变型MEK1蛋白质，其中该RAF抑制剂选自PLX4720、PLX4032、BAY 43-9006（索拉非尼）、ZM 336372、RAF 265、AAL-881、LBT-613和CJS352。

12.权利要求10的突变型MEK1蛋白质，其中该MEK抑制剂选自CI-1040、AZD6244、PD318088、PD98059、PD334581、RDEA119、化合物A和化合物B。

13.权利要求10的突变型MEK1蛋白质，其中该氨基酸置换是121C>S氨基酸置换。

14.权利要求10的突变型MEK1蛋白质，其包含SEQ ID NO：4的氨基酸序列。

15.一种将具有癌症的受试者鉴定为在用RAF抑制剂的治疗过程中具有高复发风险的方法，其包括：

（a）从该癌症的细胞中提取核酸；和

（b）测序编码MEK1蛋白质的核酸分子；

其中与野生型MEK1蛋白质相比较，产生该MEK1蛋白质中的121C>S氨基酸置换的核苷酸的存在，将该受试者鉴定为在用RAF抑制剂的治疗过程中具有高复发风险。

16.一种将具有癌症的受试者鉴定为不响应用RAF抑制剂的治疗的方法，其包括：

（a）从该癌症的细胞中提取核酸；和

（b）测序编码MEK1蛋白质的核酸分子；

其中与野生型MEK1蛋白质相比较，产生该MEK1蛋白质中的121C>S氨基酸置换的核苷酸的存在，将该受试者鉴定为不响应用RAF抑制剂的治疗。

17.一种最佳化具有癌症的受试者的治疗的方法，其包括：

（a）从该癌症的细胞中提取核酸；和

（b）测序编码MEK1蛋白质的核酸分子；

其中与野生型MEK1蛋白质相比较，产生该MEK1蛋白质中的121C>S氨基酸置换的核苷酸的存在，指示需要用RAF抑制剂和MEK抑制剂治疗该受试者，其中该MEK抑制剂靶向具有121C>S氨基酸置换的突变型MEK1蛋白质。