[发明专利]确定慢性肾病分期的方法、其设备和操作所述设备的方法

说明书

技术领域

本发明涉及用于确定慢性肾病的分期的方法和设备，以及用于操作所述设备的方法。

背景技术

慢性肾病(CKD)是一种进展的疾病，指示肾损伤的发现或肾功能恶化不进行治疗时长期持续的状态。随着其进展，所述疾病导致晚期肾衰竭，并且如果不进行人工透析或肾脏移植，生存将变得困难。

晚期肾衰竭在全球范围内增长。为了治疗这种疾病，认为早期治疗和早期检测，特别是在疾病是所谓的“隐藏的慢性肾病”时的检测是重要的。

据称日本目前有大约13,300,000名CKD患者。这表示8名成年人中大约有1人就是CKD患者。

在透析患者中最常发生的原发病是糖尿病性肾病，其是三种主要的糖尿病并发症中的一种。由于糖尿病性肾病是CKDs中的一种，因此患有糖尿病的患者可能患有CKD。按照2006年的国家健康和营养检查调查(健康、劳动和福利部(Ministry ofHealth，Labor and Welfare))估计糖尿病患者的人数为8,200,000人，包括潜在的糖尿病患者为18,700,000人。由于假定这些患者中的30％将发展肾衰竭，在将来CKD患者的人数将持续增长。例如，日本每年用于透析治疗的医疗费用约为5,400,000日元/人，总共为1.5万亿日元。由于透析患者的人数增长，透析治疗所需要的医疗费用也在增长。因此，减少这些医疗费用的措施是急需的。由于这一原因，肾损伤的早期检测、防止症状加重的早期治疗、以及最终尽可能减少导入透析的患者人数在全世界认为是重要的。

CKD按照肾小球滤过率(GFR)分期，肾小球滤过率是肾功能的评价指标。即，按照GFR(NPL1)，CKD分成五期。

然而，这样进行的CKD分期的确定是基于血清肌酸酐浓度。由于血清肌酸酐浓度受肌肉量的强影响，因此，存在问题，如排除这样的影响进行准确的确定是困难的。此外，由于直到估算的GFR(eGFR)变为50％以下时才观察到血清肌酸酐浓度的增加，因此难以发现微小的肾损伤。尽管如此，还没有开发出替代前述方法的适当的确定方法。

引用列表

非专利文献

NPL1：2007年5月23日修订的CKD Shinryo Guide[用于慢性肾病的诊断和治疗的临床实践指南(Clinical Practice Guidebook for Diagnosis and Treatment of Chronic Kidney Disease)]的第12-13页，由日本肾脏学会(Japanese Society of Nephrology)编辑，2009年出版。

发明概述

技术问题

本发明的目的在于提供一种用于确定慢性肾病的分期的方法和设备，以及用于操作所述设备的方法。

问题的方案

经过持续的反复试验，本发明人进行了各个分期之间的CKD患者的透析前血浆和透析前尿液的准确比较，并且努力寻找一种低分子量化合物，所述低分子量化合物的含量认为与分期进展有关系。

经过这样持久的努力，本发明人最终发现存在这样一种低分子量化合物，其含量随着分期进展而增加。此外，本发明人发现存在仅在特定的分期中观察到的低分子量化合物。并且，作为广泛研究的结果，本发明人发现这样的特定的低分子量化合物在血浆中的含量可以用作适当确定慢性肾病的分期的指标。

具体地，本发明如下述：

(I)用于确定慢性肾病的分期的方法

[I-1]

一种用于确定患有肾病的受试者中的慢性肾病的分期的方法，所述方法包括下述步骤：

(A-1)通过用液相色谱/飞行时间质谱在下文所示的特定条件下处理来自所述受试者的样品，确定至少一种选自由下文所示的标记(1)-(16)组成的组的标记的含量，和

(B-1)通过将已经在步骤(A-1)中测定的每种标记在来自所述受试者的样品中的含量与在每个分期中确定的参照含量范围进行比较，而确定由每个标记指示的分期：

液相色谱条件

液相色谱设备：Agilent1100系列(Agilent)；

柱：Cadenza C182x150mm，3μm(Imtakt)；

前置柱(Pre-column)：TCI OPTI-GUARD Fit ODS(TCI)；

移动相A：0.05％甲酸；

移动相B：乙腈；

对于梯度洗脱：

0-15min：移动相A中5％至95％的移动相B的线性梯度，