[发明专利]恶性肿瘤细胞的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及恶性肿瘤细胞的检测方法。

背景技术

在肿瘤细胞表面特异性表达的蛋白质可用作使用了患者的外周血、骨髓细胞、组织等的癌症诊断的细胞表面标记，通过检查其有无表达，从而也可应用于癌症治疗的效果判定、复发的监测。

进而，近年来广泛进行以在肿瘤细胞表面特异性表达的蛋白质为靶标的抗体医药品的开发。基于抗体医药品的治疗方法通过选择在正常细胞中不表达或表达量非常少的抗原作为靶标，从而作为对正常细胞造成的影响为最小限度且可期待对肿瘤细胞选择性高的治疗效果的治疗方法而备受关注。作为抗体医药品有效成分的抗体的作用机制（mechanism）多种多样，例如使用针对在B细胞中特异性表达的CD20抗原制作的单克隆抗体的属于B细胞淋巴瘤治疗药的利妥昔单抗（rituximab）对肿瘤细胞具有诱导凋亡、抗体依赖性细胞毒（antibody-dependent cellular cytotoxicity：ADCC）活性、补体依赖性细胞毒（complement-dependent cytotoxicity：CDC）活性等作用。另外，使放射性同位素键合于抗CD20单克隆抗体而得的钇（⁹⁰Y）替伊莫单抗（ibritumomab tiuxetan）在利用抗体对肿瘤细胞进行攻击的基础上，还可预见基于放射线的治疗效果，对复发、难治性B淋巴瘤治疗的有用性得到确认。

但是，现状是对肿瘤的治疗有用的单克隆抗体被限定在转移性乳腺癌、急性骨髓性白血病、顽固性慢性淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、多发性骨髓瘤等某些肿瘤种类。

因此，正在广泛开展可应用于癌症诊断、基于抗体医药品的癌症治疗的对肿瘤细胞特异的新型细胞表面标记的探索。

LR11（LDL receptor relative with11ligand-binding repeats）被鉴定为具有LDL受体家族中特征性结构的新型LDL受体样蛋白质（专利文献1、非专利文献1）。LR11被报告在因平滑肌细胞游走和增殖而形成的血管内膜肥厚部位，表达特异性亢进（非专利文献2）。本发明人等发现哺乳动物的血液中存在可溶性LR11，以及动脉硬化性疾病患者血液中的可溶性LR11浓度与健康人相比显著地为高值（专利文献2）。进而，本发明人等开发了简便、准确地测定血液、脊髓液中的可溶性LR11的方法（专利文献3、非专利文献4），测定了在各种疾病中的可溶性LR11浓度，结果确认在恶性肿瘤、特别是白血病、恶性淋巴瘤之类的造血器官肿瘤疾病中呈现异常高值，发现血液中的可溶性LR11成为新的肿瘤标记（专利文献4）。但是，可溶性LR11不一定在所有造血器官肿瘤疾病患者的血液中均呈现异常高值，其理由仍不明确。

另一方面，非专利文献5中报告了LR11的mRNA在宽范围的来源于人的组织（神经组织、肝脏、脑、外周血白细胞）中表达。进而，记载有如下内容：在人骨髓细胞中的干细胞存在的CD34＋CD38－组分（骨髓性白血病细胞）中，LR11的mRNA表达亢进，以及虽然未示出数据，但LR11的mRNA在部分造血器官肿瘤培养细胞中也表达。但是，非专利文献5仅进行了在含有培养细胞的血液前体细胞方面的概括性的基因表达分析，没有关于在蛋白质水平上表达LR11的组织的记载，也完全没有关于造血器官肿瘤与LR11mRNA表达的关系的记载。

专利文献

专利文献1：日本特开平9-163988号公报

专利文献2：WO2008/155891

专利文献3：WO2009/116268

专利文献4：日本特愿2009-285492号公报

非专利文献

非专利文献1：J.Biol.Chem.1996;271,24761-24768

非专利文献2：Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.1999;19,2687-2695

非专利文献3：J.Clin.Invest.2008;118,2733-2746

非专利文献4：Clin.Chem.2009;55,1801-1808

非专利文献5：Experimental Hematology2000;28,1286-1296

发明内容

本发明的课题在于提供通过测定在恶性肿瘤细胞表面表达的蛋白质标记而进行的恶性肿瘤细胞的检测方法。

另外，本发明的课题在于提供以对恶性肿瘤细胞的表面蛋白质特异的抗体为有效成分的恶性肿瘤治疗药。