[发明专利]用于在免疫测定中减少白细胞干扰的试剂

说明书

发明领域

本发明涉及在通过免疫测定法测定血液样本的分析物的存在或浓度的装置和方法中减少或消除来自血沉棕黄层组分特别地白细胞的干扰。具体地，本发明涉及通过利用减少或消除白细胞的活性的杀白细胞(leukocidal)试剂修正(amend)血液样本来减少或消除白细胞免疫传感器干扰。

发明背景

对生物样本进行许多针对目标分析物的实验室免疫测试以除其它原因以外，进行诊断、筛选、疾病分期、法医分析、妊娠试验和药物测试。虽然少数定性测试例如妊娠试验已被简化成供患者家庭使用的简单试剂盒，但大多数定量测试仍然需要受过训练的技术人员在实验室环境中使用尖端仪器的专门技术。实验室测试增加了分析成本并且延迟了患者的结果接收。在许多情况下，该延迟对患者的病况或预后例如表示心肌梗塞和心力衰竭的标志物的分析可以是有害的。在这些和相似的临床状况下，有利的是即时、精确、经济地以及以最短的延迟进行此类分析。

已描述了许多类型的免疫测定装置和方法。例如，用于成功地测量血液样本中的分析物的一次性使用的传感装置由Lauks公开于美国专利No.5,096,669中。用于成功地测量特征(例如凝血时间)的其它装置由Davis等公开于美国专利No.5,628,961和5,447,440中。这些装置利用读出设备和适合放入读出设备以测量作为时间的函数的血液样本中的分析物浓度和粘性改变的测试盒(cartridge)。将美国专利No.5,096,669、5,628,961和5,447,440的整个内容和公开内容通过引用整体并本文。

Miller等的美国专利申请公布2006/0160164描述了利用免疫-参考电极的免疫测定装置；Miller等的美国专利No.7,682,833描述了具有改进的样本闭包(sample closure)的免疫测定装置；Emerson Campbell等的美国专利申请公布2004/0018577描述了多重混合免疫测定；以及Davis等的美国专利No.7,419,821描述了用于分析物测量和免疫测定的设备和方法，所述专利申请公布或专利的每一个是共同拥有的并且通过引用整体并入本文。

非竞争性双位免疫测定(Non-competitive two-site immunoassay)，也称为夹心型免疫测定，通常用于测定生物测试样本中的分析物浓度，以及用于例如由Abbott Point of Care Inc.开发的即时分析物检测系统i-STAT免疫测定系统。在典型的双位酶联免疫吸附测定(ELISA)中，将一种抗体结合于固体载体以形成固定或捕获抗体，并且将第二抗体缀合于或结合于信号发生试剂例如酶以形成信号或标记抗体。在与包含待测量的分析物的样本反应后，分析物“被夹在”固定抗体与信号抗体之间。在洗去样本和任何非特异性结合的试剂后，测量保留在固体载体上的信号抗体的量，并且该量应当与样本中的分析物的量成正比。

电化学检测也已被用于免疫测定，在所述电化学检测中分析物的结合直接或间接引起邻近电极的电活性种类的活性的改变。关于电化学免疫测定的综述，参见Laurell等，Methods in Enzymology，第73卷，“Electroimmunoassay”，Academic Press，New York，339，340，346-348(1981)。

在电化学免疫传感器中，分析物与其同源抗体的结合使电极上的电活性种类的活性产生变化，将所述电极保持在适当的电化学电位下以引起电活性种类的氧化或还原。存在许多满足这些条件的构型或排列。例如，可将电活性种类直接连接于分析物，或可将抗体共价连接于从无电活性底物产生电活性种类或破坏电活性底物的酶。关于电化学免疫传感器的综述，参见，M.J.Green(1987)，Philos.Trans.R.Soc.Lond.B.Biol.Sci.，316：135-142。