[发明专利]使用alkL基因产物的生物催化的氧化方法

权利要求书

1.使用至少一种氧化酶和至少一种alkL基因产物来氧化有机物质的方法，其特征在于，独立于由含有alkL基因的alk操纵子编码的至少一种其它基因产物，提供所述alkL基因产物。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述有机物质选自：

支链的或无支链的、饱和的或不饱和的、任选地取代的烷烃、烯烃、炔烃、醇、醛、酮、羧酸、羧酸酯、胺和环氧化物，其中它们优选地具有3-22个、尤其是6-18个、更优选地8-14个、尤其是12个碳原子。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述有机物质选自：

羧酸及其对应的酯，

未被取代的烷烃，其具有3-22个碳原子，

未被取代的烯烃，其具有3-22个碳原子，

未被取代的一元醇，其具有3-22个碳原子，

未被取代的醛，其具有3-22个碳原子，

未被取代的一元胺，其具有3-22个碳原子

以及被取代的化合物，所述化合物尤其具有一个或多个羟基-、氨基-、酮-、羧基-、环丙基残基-或环氧官能团作为其它取代基。

4.根据权利要求1-3中的至少一项所述的方法，其特征在于，所述有机物质被氧化成醇，被氧化成醛，被氧化成酮，或被氧化成酸。

5.根据权利要求1-4中的至少一项所述的方法，其特征在于，所述有机物质，尤其是羧酸或羧酸酯，在ω-位置处被氧化。

6.根据权利要求1-5中的至少一项所述的方法，其特征在于，所述氧化酶是烷烃单加氧酶、二甲苯单加氧酶、醛脱氢酶、醇氧化酶或醇脱氢酶，优选烷烃单加氧酶。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述烷烃单加氧酶是细胞色素-P450单加氧酶，尤其是来自下述生物的细胞色素-P450单加氧酶：假丝酵母属，例如热带假丝酵母，或植物，例如鹰嘴豆。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述烷烃单加氧酶是alkB基因产物，其由来自选自下述的生物的alkB基因编码：革兰氏阴性细菌，尤其是假单胞菌，尤其是恶臭假单胞菌GPo1。

9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述醇脱氢酶是由alkJ基因编码的醇脱氢酶，尤其是由来自下述的生物的alkJ基因编码的醇脱氢酶：革兰氏阴性细菌，尤其是假单胞菌，尤其是恶臭假单胞菌GPo1。

10.根据权利要求1-9中的至少一项所述的方法，其特征在于，所述alkL基因产物是由来自选自下述的生物的alkL基因编码：革兰氏阴性细菌，尤其是假单胞菌，特别是恶臭假单胞菌，尤其是恶臭假单胞菌GPo1和P1，固氮菌属，Desulfitobacterium，伯霍尔德杆菌属，优选洋葱伯克霍尔德菌，黄单胞菌属，红杆菌属，罗尔斯通氏菌属，代尔夫特菌属和立克次体属，海洋柄菌属，优选地亚历山大海洋柄菌HTCC2633，柄杆菌属，优选地柄杆菌属K31种，海洋杆菌属，优选地Marinobacter aquaeolei，特别优选地Marinobacter aquaeolei VT8和红假单胞菌属。

11.根据权利要求1-10中的至少一项所述的方法，其特征在于，所述alkL基因产物选自：

由来自恶臭假单胞菌GPo1和P1的alkL基因编码的蛋白，所述alkL基因由Seq ID Nr. 1和Seq ID Nr. 3描述，和

具有多肽序列Seq ID Nr. 2或Seq ID Nr. 4的蛋白，或具有下述多肽序列的蛋白：相对于Seq ID Nr. 2或Seq ID Nr. 4，在所述多肽序列中最多60%的氨基酸残基通过删除、插入、置换或它们的组合进行修饰，且所述产物仍然具有各个参照序列Seq ID Nr. 2或Seq ID Nr. 4的蛋白的活性的至少50%。

12.根据权利要求1-11中的至少一项所述的方法，其特征在于，所述其它基因产物选自下述的至少一种：

AlkB、AlkF、AlkG、AlkH、AlkJ和AlkK。

13.根据权利要求1-12中的至少一项所述的方法，其特征在于，所述方法在至少一种微生物中或在包围至少一种微生物的培养基中进行。