[发明专利]纤维二糖水解酶变体及编码其的多核苷酸

权利要求书

1.一种亲本纤维二糖水解酶的分离的变体，其在对应于SEQ ID NO:2的位置254、285、286、330、342和360的一个或多个(几个)位置包含取代，其中所述变体具有纤维二糖水解酶活性。

2.权利要求1的变体，其中所述亲本纤维二糖水解酶是：

(a)多肽，其与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少60%序列同一性；

(b)多肽，其由多核苷酸编码，所述多核苷酸在低严格条件下与以下杂交：(i)SEQ ID NO:1的成熟多肽基因组编码序列，(ii)包含于SEQ ID NO:1的成熟多肽cDNA编码序列，或(iii)(i)或(ii)的全长互补链；

(c)多肽，其由多核苷酸编码，所述多核苷酸与SEQ ID NO:1的成熟多肽基因组编码序列，或包含于SEQ ID NO:1的成熟多肽cDNA编码序列具有至少60%同一性；或

(d)SEQ ID NO:2的成熟多肽的片段，其具有纤维二糖水解酶活性。

3.权利要求1或2的变体，其中所述亲本纤维二糖水解酶包含SEQ IDNO:2的成熟多肽或由SEQ ID NO:2的成熟多肽组成。

4.权利要求1-3任一项的变体，其中对应于位置254的取代是用Leu的取代，对应于位置285的取代是用Ile的取代，对应于位置286的取代是用Gln的取代，对应于位置330的取代是用Asn的取代，对应于位置342的取代是用Phe的取代，而对应于位置360的取代是用Gly的取代。

5.权利要求1-3任一项的变体，其中对应于位置254的取代是C254L，对应于285的取代是L285I，对应于位置286的取代是G286Q，对应于位置330的取代是D330N，对应于位置342的取代是M342F，而对应于位置360的取代是S360G。

6.权利要求1-5任一项的变体，进一步在对应于SEQ ID NO:2的位置245、382、420、437和440的一个或多个(几个)位置包含取代。

7.权利要求6的变体，其中对应于位置245的取代是用Ser的取代，对应于位置382的取代是用Cys的取代，对应于位置420的取代是用Ile的取代，对应于位置437的取代是用Gln的取代，对应于位置440的取代是用Cys的取代。

8.权利要求6的变体，其中对应于位置245的取代是A245S，对应于位置382的取代是G382C，对应于位置420的取代是L420I，对应于位置437的取代是T437Q，而对应于位置440的取代是Q440C。

9.权利要求1-8任一项的变体，其相对于亲本纤维二糖水解酶具有改善的热稳定性。

10.权利要求2-9任一项的变体，其中SEQ ID NO:2的成熟多肽是SEQ IDNO:2的氨基酸20-454。

11.权利要求2-9任一项的变体，其中SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:1的核苷酸58-1710。

12.一种具有纤维二糖水解酶活性的分离的多肽，其中所述多肽：

(a)与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少60%序列同一性；

(b)由多核苷酸编码，所述多核苷酸在低严格条件下与以下杂交：(i)SEQID NO:1的成熟多肽基因组编码序列，(ii)包含于SEQ ID NO:1的成熟多肽cDNA编码序列，或(iii)(i)或(ii)的全长互补链；

(c)由多核苷酸编码，所述多核苷酸与SEQ ID NO:1的成熟多肽基因组编码序列或包含于SEQ ID NO:1的成熟多肽cDNA编码序列具有至少60%同一性；或

(d)是SEQ ID NO:2的成熟多肽的片段；

且其中多肽氨基酸序列的一个或多个(几个)位置与SEQ ID NO:2的相应位置254、285、286、330、342和360不同。