[发明专利]利用脂肪酶的含高度不饱和脂肪酸的油脂的制造方法

说明书

技术领域

本发明涉及利用脂肪酶反应制造含高度不饱和脂肪酸的油脂的方法。

背景技术

高度不饱和脂肪酸不仅是包括人在内的脊椎动物生长中所必需的营养素，而且近年较多报告了其与心血管系疾患、炎症性疾患相关。特别是较多报告了如下见解：摄取二十二碳六烯酸、二十碳五烯酸这样的n-3系的高度不饱和脂肪酸对人的健康有用。也报告了n-3系的高度不饱和脂肪酸的摄取量和n-6系高度不饱和脂肪酸的摄取量的比率是重要的。在工业化社会中存在有能量摄取量、饱和脂肪酸摄取量以及n-6系高度不饱和脂肪酸摄取量增加的倾向，以及n-3系高度不饱和脂肪酸摄取量减少的倾向这样的特征，可认为这种特征与各种成人病等相关。

鱼油是富含n-3系高度不饱和脂肪酸的油脂，它们的摄取被广泛推荐，并且为了更高效地摄取n-3系高度不饱和脂肪酸，正在进行将鱼油中的n-3系高度不饱和脂肪酸浓缩的研究。使用脂肪酶反应进行高度不饱和脂肪酸的浓缩是其中之一。

脂肪酶是催化将油脂水解为游离脂肪酸和甘油的反应的酶，已知各种动植物、微生物具有脂肪酶。某种脂肪酶不会同样地作用于全部的脂肪酸，其反应性因甘油酯中的键位置、脂肪酸的碳链长、双键数等而不同。因此，可使用这样的脂肪酶将脂肪酸选择性水解，其结果，可在甘油酯馏分中将特定的脂肪酸浓缩。已知例如使用某种假丝酵母(Candida)属所产生的脂肪酶时，则通过鱼油的水解反应而使二十二碳六烯酸等高度不饱和脂肪酸浓缩于未分解的甘油酯馏分中(专利文献1)。

这样地利用脂肪酶而进行的水解反应对于高度不饱和脂肪酸的浓缩而言是有效的方法。越是针对除了目标的高度不饱和脂肪酸以外的脂肪酸而进行水解，越进行甘油酯馏分中的高度不饱和脂肪酸的浓缩。然而，实际上随着高度不饱和脂肪酸在甘油酯馏分中的浓缩的推进，水解反应变钝，进一步为了高度地推进水解反应而需要添加过量的酶。在添加了过量的酶的情况下，水解反应进一步进行，但是接下来连目标的高度不饱和脂肪酸也会进行水解反应，以及伴随水解的增加而导致浓缩的效果减少并且收率也降低。另外，脂肪酶随着水解反应的时间的经过而缓慢失活，因而去除活性减少了的酶，使用新的酶进行再反应从而可进一步推进水解。然而，在此情况下当水解的程度过度进行时，则收率的降低也显著，目标的高度不饱和脂肪酸的浓缩效果也无法显现。

已有如下报告：在用源自柱状假丝酵母(Candida cylindracea)的脂肪酶将鱼油水解的情况下，通过增加脂肪酶的用量，或延长反应时间，或者反复进行基于脂肪酶的水解，从而可提高分解油的酸值，目标高度不饱和脂肪酸的浓缩被推进，但是从酸值超过160的附近开始，高度不饱和脂肪酸的浓缩度反而减少(专利文献1)。即，意味着通过过量的水解反应推进目标高度不饱和脂肪酸的浓缩时，目标的高度不饱和脂肪酸的水解的频率变高；随着浓缩率的提高，目标的高度不饱和脂肪酸的损失的比例也升高，以某一点为分界浓缩率不提高而净是损失。当然，推进水解也就是使甘油酯的收量减少，因此，在利用该脂肪酶的水解将高度不饱和脂肪酸进行浓缩时出现极限点，不得不按照所获得的油脂制品的成品率和目标脂肪酸的浓缩效率这两者的平衡而设定酶的添加量、反应时间等。

关于酶反应的温度，已知根据各种酶的最适温度，在其范围内进行反应，但是在脂肪酶的情况下，成为脂肪酶反应对象的油脂在低温时粘度变高，与包含酶的水的搅拌效率变差，因此通常在30-40℃中进行。例如，在浓缩高度不饱和脂肪酸时使用源自柱状假丝酵母(Candida cylindracea)的脂肪酶的情况下，反应温度在专利文献1(1982年申请)的实施例中为室温，在其后的专利文献2-7(分别为1988、1993、1994、1995、1996、1999年申请)的实施例中分别为37、37、37、30、35、35℃。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特公平4-16519号

专利文献2：日本特开平1-269496号

专利文献3：日本特开平7-51075号

专利文献4：日本特开平7-268382号

专利文献5：日本特开平8-214892号

专利文献6：WO98/18952

专利文献7：日本特开2001-54396号

发明内容

发明要解决的问题