[发明专利]修饰植物中酶的活性

权利要求书

1.遗传修饰的烟草植物细胞或包含所述修饰的植物细胞的烟草植物，其中修饰的植物细胞包含至少对在包含N-乙酰基-葡糖氨基转移酶的编码序列的基因组区域中的第一靶标核苷酸序列的修饰，这使得(i)修饰的植物细胞中的糖基转移酶的活性或表达相对于未修饰的植物细胞是降低的，且(ii)修饰的植物细胞中产生的蛋白质的N-聚糖上的α-1,3-岩藻糖或β-1,2-木糖或二者相对于未修饰的植物细胞是降低的。

2.权利要求1的修饰的烟草植物细胞或烟草植物，其另外包含(a)至少对包含β(1,2)-木糖基转移酶的编码序列的基因组区域中的第二靶标核苷酸序列的修饰，或(b)至少对包含α(1,3)-岩藻糖基转移酶的编码序列的基因组区域中的第三靶标核苷酸序列的修饰，或(a)和(b)的组合。

3.权利要求1的修饰的烟草植物细胞或烟草植物，其进一步包含在第一靶标核苷酸序列、第二靶标核苷酸序列、第三靶标核苷酸序列或任何两个或更多个前述靶标核苷酸序列的组合的等位基因变体中的修饰。

4.前述权利要求中任何一项的修饰的烟草植物细胞或烟草植物，其中第一靶标核苷酸序列为

a.与选自SEQ ID NO:12、13、40、41、233、256、259、262、265、268、271、274、277、280的核苷酸序列有至少70%、特别是至少80%、特别是至少90%的同一性；

b.与选自SEQ ID NO:20、21、212、213、219、220、223、227、229、234、257、260、263、266、269、272、275、278、281的核苷酸序列有至少95%、特别是至少98%、特别是至少99%的同一性。

5.根据权利要求2-4中任何一项的修饰的烟草植物细胞或烟草植物，其中第二靶标核苷酸序列为

a.与选自SEQ ID NO:1、4、5、和17的核苷酸序列有至少70%、特别是至少80%、特别是至少90%的同一性;

b.与选自SEQ ID NO:8和18的核苷酸序列有至少95%、特别是至少98%、特别是至少99%的同一性。

6.根据权利要求2-5中任何一项的修饰的烟草植物细胞或烟草植物，其中第三靶标核苷酸序列为

a.与选自SEQ ID NO:27、32、37和47的核苷酸序列有至少70%、特别是至少80%、特别是至少90%的同一性;

b.与选自SEQ ID NO:28、33、38和48的核苷酸序列有至少95%、特别是至少98%、特别是至少99%的同一性。

7.根据前述权利要求中任何一项的修饰的烟草植物细胞或烟草植物，其中植物为烟草栽培种PM132,其以登记号NCIMB 41802保藏。

8.根据前述权利要求中任何一项的修饰的烟草植物的后代，其中所述后代植物包含如前述权利要求中任何一项中所限定的修饰中的至少一种，其中糖基转移酶的活性或表达相对于未修饰的植物是降低的且(ii)修饰的植物中产生的蛋白质的N-聚糖上的α-1,3-岩藻糖或β-1,2-木糖或二者相对于未修饰的植物细胞是降低的。

9.用于产生异源蛋白质的方法，所述方法包括：将包含编码异源蛋白质的核苷酸序列的表达构建物引入权利要求1-8中任何一项所限定的修饰的烟草植物细胞或植物中，所述异源蛋白质特别是疫苗抗原、细胞因子、激素、凝血蛋白质、载脂蛋白、用于人类替代疗法的酶、免疫球蛋白或其片段；以及培养包含所述表达构建体的修饰的植物细胞以产生异源蛋白质，以及可选地，由所述植物细胞再生植物并培养所述植物及其后代。