[发明专利]移植片的评价方法

说明书

技术领域

本发明涉及评价移植片的移植适宜性的方法。

背景技术

虽然近年心脏病治疗在不断革新进步，但仍然没有建立起重症心力衰竭的治疗体系。作为心力衰竭的治疗法，进行的是利用阻滞剂、ACE抑制剂的内科治疗，但对这些治疗不很奏效的重症化的心力衰竭而言，进行辅助人工心脏、心脏移植等置换型治疗，也即外科治疗。

这类成为外科治疗对象的重症心力衰竭包括多种起因，如进行性心脏瓣膜症、高度的心肌缺血所致、急性心肌梗塞和其合并症、急性心肌炎、缺血性心肌病（ICM）、扩张型心肌病（DCM）等所致的慢性心力衰竭及其急性加重等。

根据上述原因和重症度，而应用瓣膜成形术/置换术、冠状动脉架搭桥术、左心室成形术、机械辅助循环等。

其中，对于ICM、DCM所致的高度左心室功能低下导致的心力衰竭而言，仅仅心脏移植和利用了人工心脏的置换型治疗可以视为其的有效治疗方法。但是，这些重症心力衰竭患者的置换型治疗存在慢性的供体不足、需要持续进行免疫抑制、引发合并症等很多需要解决的问题，难以称为适用于所有重症心力衰竭的普适治疗法。

由于这样严峻的心脏移植现状，在一个时期内曾尝试进行巴提斯塔（Batista operation）术等其它外科治疗，虽然其作为心脏移植的代替治疗而广受关注，但最近这些手术的限制也逐渐显现，需要在手术法的改良和适应性的确立方面继续努力。

另一方面，最近认为，作为重症心力衰竭治疗的解决方案，新型再生医疗的开展是必不可少的。

在重症心肌梗塞等中，心肌细胞陷入功能衰竭，进而发生成纤维细胞的增殖、间质纤维化，而呈现心力衰竭。随着心力衰竭的加重，心肌细胞受损直至细胞死亡，由于心肌细胞几乎不发生细胞分裂，因此心肌细胞数减少，心脏功能下降进一步加剧。

对于这类重症心力衰竭患者的心脏功能恢复而言，细胞移植法被认为是有用的，并已经开始了自身骨骼肌成肌细胞的临床应用。

近年，作为其一个例子，通过使用利用组织工程学的温度响应性培养皿，提供一种包括来自于成体心肌以外部分的细胞的、能够用于心脏的三维结构的细胞培养物和其制造方法（专利文献1）。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开2007－528755号公报

发明内容

发明要解决的问题

本发明的目的在于，提供一种简便且准确地评价包含具有多核化功能的细胞的移植用试样的移植适宜性的方法。

用于解决问题的方案

如上所述，虽然近年利用再生医疗已开发了应可解决细胞移植的各种问题的各种移植片、尤其是片状细胞培养物等，但现状是所述移植片依然难以制造，成本也高。

但是，本发明人即使在以同样的方法对利用同样的方法制造的移植片进行移植时，遭遇了细胞的存活率、组织化的状态方面产生差异这一此前未知的新课题。为了解决所述课题持续进行了研究，发现骨骼肌成肌细胞的片状细胞培养物中，当将片状的骨骼肌成肌细胞解离、在培养基中孵育该解离细胞时，在形成融合细胞更多的群中，产生更多的促进心肌再生的细胞因子，进而继续进行深入研究，从而完成了本发明。

即，本发明涉及以下方案。

（1）一种对包含具有多核化功能的细胞的移植用试样的移植适宜性进行评价的方法，其包括求出多核化能力的工序，所述多核化能力为表征所述具有多核化功能的细胞进行多核化的能力的指标。

（2）根据（1）的方法，求出多核化能力的工序包括：

（i）将1或2个以上的所述移植用试样的一部分解离成单个细胞的步骤、

（ii）对（i）中解离后的细胞进行接种、孵育的步骤、及

（iii）检测（ii）中孵育的细胞培养物中的多核细胞的步骤，

所述方法包括对求出的多核化能力和预先设定的阈值进行比较的工序。

（3）根据（1）或（2）的方法，其中，具有多核化功能的细胞为骨骼肌成肌细胞。

（4）根据（1）～（3）的方法，其中，多核化能力为多核化率。

（5）根据（1）～（3）的方法，其中，具有多核化功能的细胞为骨骼肌成肌细胞，求出的多核化能力为多核化率，将该多核化率大于预先设定的阈值的情况评价为适合用于心脏移植。

（6）一种对包含具有多核化功能的细胞的移植用试样的移植适宜性进行评价的系统，其包括：用于检测多核细胞的检测部、及用于求出多核化能力的计算部。