[发明专利]确定肿瘤转移可能性的方法

说明书

技术领域

本发明涉及肿瘤生物学领域。本发明尤其提供了一种用于确定肿瘤早期转移可能性的方法。本发明对作为转移复发的前提条件的肿瘤细胞的播散及这些细胞在骨髓(BM)和/或远处器官中的存活具有重要影响。通过确定从患者获得的肿瘤样品中RAI2和可选择的其它基因的表达，以评估患者肿瘤转移的风险和/或与癌症相关的死亡的风险。本发明进一步提供了一种用于确定RAI2和/或其它基因的表达的试剂盒。本发明公开了一种包括基因或蛋白形式的RAI2的药物组合物，该药物组合物尤其用于预防和/或治疗肿瘤的转移，且因此用于预防与癌症相关的死亡。

背景技术

来源于上皮组织的固体肿瘤(即癌)是工业化国家中癌症的主要形式，且在德国每年有近380,000件新病例。这些肿瘤发展中的关键因素是肿瘤细胞从原发病灶通过血液循环进入远处器官的全身性扩散。转移作为与癌症相关的死亡的主要原因是复杂的多步骤的过程。即使通过高分辨率成像技术也仍检测不到该关键过程的开始(即单个肿瘤细胞的播散)，因为这些技术不能在单个细胞水平检测正在转移的细胞(Pantel等，2008)。本发明人和其他研究人员已示出播散的肿瘤细胞(DTC)的存在是乳腺癌(Braun等，2005)和其它固体肿瘤(等，2008；Dango等，2008)中转移复发的独立的预报因子。这些DTC细胞经过化疗后仍可存活，且在BM中以“休眠”状态存留多年(Janni等，2005)，这表明BM可能是转移细胞的储存器(Wikman等，2008；Pantel等，2008)。迄今为止，还不清楚是否由于DCT中再次(de novo)发生突变还是来自周围环境的信号使得这些细胞从休眠状态中脱出，从而导致增殖和明显的转移的形成(Pantel等，2008；Wikman等，2008)。已示出在乳腺癌患者的骨髓中检测到的大部分早期播散的癌细胞具有CD44(+)和CD24(-/低)的表型。该公认的乳腺癌干细胞表型存在于与自我更新和致瘤可能性相关的原发乳腺癌的小部分群体中(Balic等，2006)。

迄今为止，几个重要的致癌基因和肿瘤抑制基因(TSG)对乳腺癌形成是众所周知的，其中包括HER2、p53和EGFR。但对专一促进或抑制转移级联过程关键步骤的基因的特异作用却知道的很少。在这些中，由定义可知，转移抑制基因(MSG)在转移级联过程的任意步骤处抑制转移，但不会阻止原发肿瘤的生长(Stafford等，2008)。由于这类基因编码具有广泛生化活性的蛋白，因此仅通过它们能够抑制转移的能力来统一这类基因。已示出正在扩展的转移抑制基因的名单通过调节信号转导途径和通过其它像粘附迁移、凋亡和血管生成一样多样性的分子功能来起作用(Stafford等，2008)。此外，MSG对转移级联过程的不同阶段产生影响，以显现它们的抑制效果。一些MSG(如E-钙粘蛋白或凝溶胶蛋白(Gelsolin))抑制原发肿瘤中肿瘤细胞的运动性和侵润，而其它MSG(如DCC和半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-8)抑制循环中的细胞存活(Eccles等，2007)。已暗示其它MSG在肿瘤休眠中的继发灶(secondary site)处起作用，从而调节转移的最终阶段。但是由于转移是癌症相关死亡的主要原因，且转移中的每一个步骤均被认为是速率限定性的(Pantel和Brakenhoff，2004)，因此抑制转移级联过程中的任一步骤的基因或蛋白的重建均应为癌症患者的治疗提供了有希望的治疗窗口。

虽然靶定阴性调节因子是具有技术挑战性的，但最近的工作已成功地重新导入MSG的功能，给予了基因产物本身(Taneka等2007)或被抑制蛋白调节的靶定的可作为药物的分子(Boucharaba 2006)。虽然这些策略中还没有一个在常规临床应用中使用，但正在临床前和临床试验中对这些策略进行试验。因此，其它MSG的识别可促使发现其它有希望的基于转移抑制基因的策略。

已开发出用于骨髓和外周血中播散的肿瘤细胞的富集、检测和鉴定的新技术。可在数百万的正常骨髓或血液细胞的背景下检测到单个播散的肿瘤细胞(DTC)。使用免疫细胞化学双染色技术，已描述了DTC中不同蛋白的表达模式，包括Ki-67、p120、EGFR、Her2、转移-R、EMMPRIN、uPAR和EpCam(Pantel和Brakenhoff，2008)。