[发明专利]从去分化的、非诱发的刺阿甘树细胞的体外培养物产生的制剂、其用于治疗皮肤老化、炎症和疤痕的用途及其生产

说明书

技术领域

本发明的目的在于源自去分化、非诱发的阿甘树细胞体外培养物的制剂、含有所述制剂的化妆品或皮肤病学组合物、及其用于治疗皮肤老化、炎症和愈合的用途。

背景技术

阿甘树是一种属于植物山榄科的树，其学名为刺阿甘树（Argania spinosa(L.)Scelles）。

它的习性与橄榄树相似；其具有短且扭曲的树干。木材非常坚硬致密。枝非常多刺，且它们有小的、披针形的、互生的、短（约2厘米长）且窄的叶，叶往往汇集成簇。叶是常绿的，但遇严重干旱时，叶死亡并脱落。花是雌雄同株的且为五聚体。它们集中在团伞花序中，并在五月和六月开花。它们是黄绿色的。

阿甘树从5龄开始能结出果实。果实为黄色，椭圆形无柄浆果，约4-5厘米长。它由围绕着坚果的浆组成，坚果含有2至3个粘在一起的扁平种子，各种子包裹着富含油的仁。

阿甘树是摩洛哥特有的并主要位于索维拉和阿加迪尔之间的摩洛哥西南部。阿甘树林覆盖约830000ha。

由于阿甘树特别坚硬的木质，摩洛哥人们最先将其用作燃料供应。其它主要传统用途是手工初步提取的油，但现在使用压榨来提取。这种油的首要用途是作为食物；另一个重要的应用目前是用于化妆品。源自油的生产的浆和残余的粕通常用于动物饲料。

许多美容产品是从阿甘树开发的。已经有若干针对源自种子的油的发明专利，例如通过溶剂获得的油（专利Fr 2 553 788）、富含非皂化物的阿甘树油（专利Fr 2 724 663）。

除油以外的物质也授予了专利，例如源自油提取之后获得的种子粕的肽；来自油和粕的肽的组合物用于治疗皮肤老化有关的问题（专利Fr 2 756 183）。也有来自阿甘树的叶、粕的蛋白质和皂甙的发明专利=来自叶的提取物（专利EP 1 213 025）、粕蛋白质（专利EP 1 213024）、粕皂甙（专利EP 1 430 900）。最近，专利申请EP 1 968 536经保藏公开了来自阿甘树果实的浆的提取物在抗老化化妆品中的用途。

因此，整个阿甘树的组合物对于皮肤病学和/或美容用途是令人感兴趣的。

阿甘树是一种重要的资源植物，因为首先生态学上地，它是一个“生态系统”植物。它完全适应干旱地区，它保护土壤免于水蚀和风蚀，从而防止沙漠逼近摩洛哥内。而且还因为在经济上，它是一种具有多种用途的树。

它是摩洛哥的主导作物。因此，阿甘树林受1925年颁布的诏令（dahir）（法令）的保护，写道国家对于阿甘树林享有最高权利，但当地群众享有用益权（阿甘树下的果实、枯木、作物）。UNESCO最近将阿甘树林列为生物圈储备。

这就是为什么其木材或叶用于化妆品用途的利用可对此受保护的植物产生严重的后果。

从植物获得兴趣分子的另一种手段是制备全能去分化的细胞培养物。使用去分化的植物细胞还可以避免一些化妆品产品开发过程中遇到的工业化问题。采用细胞培养物，不存在不同植物批次或收割之间兴趣物质浓度上的差异。它也是一种非破坏性的技术，相对容易且价格低廉地建立。最后，由于细胞在培养基中且活性化合物在培养基中或在细胞内液体中，这排除了对提取的需求。因此简单的研磨就可以获得这些化合物。

专利申请WO03077881公开了用于局部应用的含有至少一种体外培养物中去分化的且诱发的植物细胞匀浆物来合成至少一种植物抗毒素的组合物。植物材料优选来自藤。

发明内容

因此，本文件公开了可以去分化并诱发的植物细胞的化妆品应用，诱发产生足够量的次级代谢物使得能够具有局部用途中的生物活性。

令人惊奇和意外的是，申请人已证明源自去分化但非诱发的阿甘树细胞的体外培养物在抗老化、炎症和愈合领域具有良好的化妆品和/或皮肤病学活性。

得到的结果表明，在阿甘树的特定情况下，阿甘树细胞培养物的另一种应用（在这种情况下非诱发细胞）可能在上面提到的内容范围内。

此外，按照本发明所公开的而获得制剂可以消除对诱发步骤的需求，诱发步骤在工业上是困难且昂贵的步骤；由于细胞生长缓慢，诱发导致更低的生物质产量。

申请WO03077881提到了进行这种诱发的各种方式，例如UV辐射3天；二氧化碳持续24小时至2天；UV辐射和二氧化碳5天。

在本发明的框架内进行的方法，由来自源自阿甘树的植物材料的细胞去分化然后在悬液中细胞培养组成，其可以快速地产生精细的、丰富的、均匀的和无菌的这种植物的生物质。细胞培养使得有可能将这种植物的生物合成途径直接应用到细胞规模。