[发明专利]用于生物合成对甲苯甲酸和对苯二甲酸的微生物和方法

权利要求书

1.非天然存在的微生物，包括一种具有(2-羟基-3-甲基-4-氧代丁氧基)膦酸酯途径的微生物，该微生物包含至少一种编码以足以产生(2-羟基-3-甲基-4-氧代丁氧基)膦酸酯的量表达的(2-羟基-3-甲基-4-氧代丁氧基)膦酸酯途径酶的外源核酸，所述(2-羟基-3-甲基-4-氧代丁氧基)膦酸酯途径包含2-C-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸脱水酶。

2.权利要求1的非天然存在的微生物，其中所述(2-羟基-3-甲基-4-氧代丁氧基)膦酸酯途径还包含1-脱氧木酮糖-5-磷酸合酶或1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶。

3.权利要求1的非天然存在的微生物，其中所述(2-羟基-3-甲基-4-氧代丁氧基)膦酸酯途径还包含1-脱氧木酮糖-5-磷酸合酶和1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶。

4.权利要求1的非天然存在的微生物，其中所述微生物包含三种外源核酸，各自编码(2-羟基-3-甲基-4-氧代丁氧基)膦酸酯途径酶。

5.权利要求4的非天然存在的微生物，其中所述三种外源核酸编码2-C-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸脱水酶、1-脱氧木酮糖-5-磷酸合酶和1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶。

6.权利要求1的非天然存在的微生物，其中所述至少一种外源核酸是异源核酸。

7.权利要求1的非天然存在的微生物，其中所述非天然存在的微生物是在基本上厌氧的培养基中。

8.用于生产(2-羟基-3-甲基-4-氧代丁氧基)膦酸酯的方法，包括将权利要求1的非天然存在的微生物在足以产生(2-羟基-3-甲基-4-氧代丁氧基)膦酸酯的条件下培养足够的时间周期。

9.权利要求8的方法，其中所述非天然存在的微生物是在基本上厌氧的培养基中。

10.权利要求8的方法，其中所述微生物包含三种外源核酸，各自编码(2-羟基-3-甲基-4-氧代丁氧基)膦酸酯途径酶。

11.权利要求10的方法，其中所述三种外源核酸编码2-C-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸脱水酶、1-脱氧木酮糖-5-磷酸合酶和1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶。

12.权利要求8的方法，其中所述至少一种外源核酸是异源核酸。

13.非天然存在的微生物，包括一种具有对甲苯甲酸途径的微生物，该微生物包含至少一种编码以足以产生对甲苯甲酸的量表达的对甲苯甲酸途径酶的外源核酸，所述对甲苯甲酸途径包含2-脱氢-3-脱氧磷酸庚糖酸合酶、3-脱氢奎尼酸合酶、3-脱氢奎尼酸脱水酶、莽草酸脱氢酶、莽草酸激酶、3-磷酸莽草酸-2-羧基乙烯基转移酶、分支酸合酶或分支酸裂合酶。

14.权利要求13的非天然存在的微生物，其中所述微生物包含两种外源核酸，各自编码对甲苯甲酸途径酶。

15.权利要求13的非天然存在的微生物，其中所述微生物包含三种外源核酸，各自编码对甲苯甲酸途径酶。

16.权利要求13的非天然存在的微生物，其中所述微生物包含四种外源核酸，各自编码对甲苯甲酸途径酶。

17.权利要求13的非天然存在的微生物，其中所述微生物包含五种外源核酸，各自编码对甲苯甲酸途径酶。

18.权利要求13的非天然存在的微生物，其中所述微生物包含六种外源核酸，各自编码对甲苯甲酸途径酶。

19.权利要求13的非天然存在的微生物，其中所述微生物包含七种外源核酸，各自编码对甲苯甲酸途径酶。

20.权利要求13的非天然存在的微生物，其中所述微生物包含七种外源核酸，各自编码对甲苯甲酸途径酶。

21.权利要求19的非天然存在的微生物，其中所述八种外源核酸编码2-脱氢-3-脱氧磷酸庚糖酸合酶、3-脱氢奎尼酸合酶、3-脱氢奎尼酸脱水酶、莽草酸脱氢酶、莽草酸激酶、3-磷酸莽草酸-2-羧基乙烯基转移酶、分支酸合酶和分支酸裂合酶。

22.权利要求13的非天然存在的微生物，其中所述微生物还包含(2-羟基-3-甲基-4-氧代丁氧基)膦酸酯途径。