[发明专利]用于保存铝盐佐剂和铝盐-佐剂化疫苗的方法

说明书

技术领域

本发明涉及用于在冷冻或干燥期间保存铝盐佐剂的方法，典型地在冷冻或干燥包含铝盐佐剂和一种或多种疫苗抗原的疫苗制剂期间。

背景技术

目前铝盐佐剂是最广泛使用的用于人类和牲畜疫苗的佐剂。铝佐剂化合物包括铝盐，如磷酸铝（AlPO₄）和氢氧化铝（Al(OH)₃），其在疫苗佐剂领域中通常称为“明矾（铝盐）”。为了提供充分的免疫原性，认为抗原必须吸附到佐剂的表面上。认为明矾佐剂充当免疫系统刺激物，以及向给予（例如通过注射）的部位提供抗原库，从而提供抗原的逐渐和连续的释放以刺激抗体产生。已知以其天然形式的铝佐剂通常称为凝胶，其为水性介质中的颗粒悬浮液。

明矾-佐剂化疫苗的储存和运输是有问题的。冷冻干燥（冻干）是一种经常用于改善不同蛋白制剂的长期稳定性的过程（工艺，process）。然而，不能在不对佐剂的结构造成破坏的情况下冷冻干燥包含铝盐佐剂的商用疫苗组合物。冷冻干燥引起佐剂的凝胶结构的崩塌，导致再悬浮于水中时佐剂盐的团聚和沉淀。效果是显著降低了疫苗的免疫原性。

WO 01/93829描述了一种制备佐剂化疫苗的方法，包括喷雾干燥或喷雾冷冻干燥水溶液，该水溶液包括：

（a）按重量计从0.1%至0.95%的其中吸附有抗原的铝盐或钙盐佐剂；

（b）按重量计从0.5%至6%的糖类；

（c）按重量计从0.1%至2%的氨基酸或其盐；以及

（d）按重量计从0.02%至1%的胶体物质。

WO 2008/118691描述了制备免疫原-活性的结合佐剂的经干燥的疫苗组合物的方法，包括（a）使至少一种铝盐佐剂、至少一种缓冲系统、至少一种玻璃形成剂和至少一种抗原相结合，以产生液体疫苗剂型（配方）；

（b）冷冻液体疫苗剂型以产生冷冻的疫苗剂型；以及（c）冻干已冷冻的疫苗剂型以产生干燥的疫苗组合物。优选玻璃形成剂是海藻糖。

发明内容

出乎意料地，本发明的发明人发现在式（I）或（II）的化合物或其生理用盐或酯存在的情况下通过冷冻或干燥，尤其是冷冻干燥佐剂可以降低对铝盐佐剂的结构破坏。额外存在一种或多种糖类可以导致在冷冻或干燥期间进一步降低对佐剂的结构破坏。

因此，本发明提供了用于在冷冻或干燥期间保存铝盐佐剂的方法，该方法包括冷冻或干燥含水悬浮液或溶液，其包括：

（a）铝盐佐剂；

（b）式（I）的化合物或其生理用盐或酯

其中：

-R₁表示氢或C_1-6烷基；以及

-R₄表示氢；或

-R₁和R₄与连接至其的原子一起形成吡咯烷环；

-R₂表示氢、C_1-6烷基或-(CH₂)_2-5NHC(O)(CH₂)_5-15CH₃；以及

-R₃表示C_1-6烷基；或

式（II）的化合物或其生理用盐或酯

其中：

-X表示-S(O)₂-或-S⁺(R_c)-；

-R_a和R_b独立地表示C_1-6烷基；以及

-R_c表示由羧酸根（羧酸酯，羧酸盐）阴离子和用胺（-NH₂）部分取代的C_1-6烷基；以及

（c）可选地，一种或多种糖类。

本发明还提供了：

-赋形剂在冷冻或干燥期间用于保存铝盐佐剂的应用，该赋形剂包括（i）本发明的式（I）或（II）的化合物或其生理用盐或酯，以及（ii）可选地，一种或多种糖类；

-疫苗组合物，包括：铝盐佐剂；一种或多种抗原；本发明的式（I）或（II）的化合物或其生理用盐或酯；以及可选地，一种或多种糖类。

-由本发明的方法可获得的疫苗组合物；以及