[发明专利]用于保护免于二级病原体引起的疾病的方法

说明书

相关申请的交叉引用

本申请根据美国法典第35篇第119(e)条要求获得2010年3月10日提交的美国临时申请序列号61/312,380的优先权，其内容由此完整地通过引用而并入。

发明领域

发现施用针对初级病原体的疫苗保护免于二级或机会病原体引起的疾病。例如，通过针对旁系病原体(collateral pathogens)免疫保护犬免于二级病原体如马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi subspecies zooepidemicus)(马链球菌(S. equi))引起的疾病。

发明背景

马链球菌(S. equi)与犬传染性呼吸道疾病(CIRD)相关，其已被公认为主要影响舍养狗(kenneled dogs)的多因素感染(Chalker等, Veterinary Microbiology 95 (2003):149-156)。然而发现，可以从无症状的、健康的非舍养狗分离马链球菌。马链球菌仅仅与其它病原体相结合促成CIRD的严重性。

犬流感(CIV)已经被鉴定为与马流感病毒高度同源的H3N8病毒。已经发现犬流感在某些类型的狗中是强毒的。例如，发现它是杀死Jacksonville, Florida的狗舍中数条赛狗(racing Greyhounds)的病发的原因。虽然100％的暴露的狗被感染，但是仅仅发现80％显现出感染的临床体征。而且，尽管一些暴露于CIV的狗发生具有肺炎的临床体征的急性疾病，大多数狗经历较温和的综合征，如持续10-21天的咳嗽。

我们已经发现，马链球菌和CIV的严重性均通过与其中另一病原体的共感染增加。

发明概述

保护犬免于二级病原体引起的疾病的方法包括施用针对初级病原体的疫苗。在一个优选的实施方案中，以CIV疫苗免疫待保护的犬，从而保护犬免于二级病原体如马链球菌引起的疾病。作为结果，犬针对CIV和马链球菌二者得以保护。

附图简要说明

图1，CIV攻击后的临床评分，该图表示从CIV攻击前2天至攻击后13天每个处理组的平均临床评分。在研究的第35天用CIV攻击所有的狗，从CIV攻击前第2天至CIV攻击后13天每天监测临床体征。将每个处理组的平均临床评分针对攻击后的天数作图。临床评分参见表4。

图2，攻击后的鼻CIV脱落，该图表示通过在攻击后第1-10天每天收集鼻拭子测定的每组的平均病毒滴度。在第35天用CIV攻击第1、3和4组中所有的狗。在攻击前那天(第-1天)收集鼻拭子以验证小狗没有CIV。通过每天收集鼻拭子 (攻击后第1天至第10天)达10天以及在MDCK单层上进行滴定以监测被攻击的狗中的鼻病毒脱落。计算每个处理组的平均病毒滴度(表示为Log ₁₀ TCID₅₀/mL)并针对攻击后的天数作图。

图3，从鼻拭子和肺灌洗液分离马链球菌，该图表示从CIV攻击前那天至攻击后第14天每组中马链球菌阳性的狗的百分比。

发明的详细说明

本发明涉及保护犬免于二级病原体引起的疾病的方法，所述二级病原体在不存在损害性因素如与另一种病原体共感染的情况下没有表现临床体征。在这种情况下，即使任一病原体本身不会表现临床体征，但它们两种一起导致增强的发病和临床显著的疾病。

犬流感病毒(CIV)亚型H3N8在某些狗中可以引起急性呼吸道疾病。我们通过研究用CIV和马链球菌共感染狗之后的发病确定了马链球菌兽疫亚种(马链球菌)加重了CIV引起的疾病。类似地，我们发现，单独用马链球菌感染的狗没有表现临床体征，但是当用CIV和马链球菌二者攻击时，观察到活跃的临床疾病。然后我们发现，用CIV疫苗免疫保护狗免于强毒的CIV和马链球菌的双重攻击。出乎意料的是，通过施用针对CIV的疫苗可以预防马链球菌引起的呼吸道疾病。

单独用马链球菌攻击的狗没有表现任何临床体征、细菌脱落(shedding)或肺部病变。单独用CIV攻击的狗发生了一些临床体征、病毒脱落和肺部病变。当与单独用CIV或单独用马链球菌攻击的狗相比时，用CIV加上马链球菌攻击的狗中的临床评分、CIV和/或马链球菌脱落和肺部评分实质上更高。当与单独用CIV或用CIV加上马链球菌攻击的未接种的狗相比时，用CIV加上马链球菌攻击的CIV接种的狗中肺部评分、临床评分和细菌脱落明显更低。