[发明专利]分析装置

说明书

技术领域

本发明涉及一种分析装置，特别涉及一种组合了基于抗原-抗体反应进行精制和质量分析检测的分析装置。

背景技术

蛋白质、肽、激素及它们的代谢物等生理活性物质是承担用于调整生物体内特定的器官进行运转的信息传达作用的物质，在生命活动中起着重要的作用。因此，检测生理活性物质的浓度对于特定的疾病是重要的。例如，报告了作为女性激素的雌激素的增减与乳癌的危险性相关。生理活性物质以非常微小的量发挥其作用，在体内的浓度为pg/mL～ng/mL级，非常低。因此，谋求简便且准确定量生物体试料中的生理活性物质的方法。

用于定量生理活性物质的方法之一为免疫法。使用免疫法的自动分析装置可随机接入，输出量高，因此作为临床检查装置而被广泛使用(专利文献2)。例如，免疫法应用对测定对象成分特异性识别的抗体，例如将被检体中的测定对象成分用抗体(一级抗体)捕获后，再使用对该一级抗体选择性捕获的二级抗体进行检测。另一方面，已知免疫法中通常产生交叉反应性。交差反应性是指一级抗体不仅仅识别本来应该识别的测定对象成分，还捕获例如与测定对象成分的代谢物具有类似结构的分子的现象。特别是生理活性物质，由于为低分子，抗体识别的特异性低，因此，呈现了交叉反应。

另外，质量分析法在临床检查中的应用广泛，可使用对生理活性物质进行定量的方法。质量分析法是基于对象成分的质量进行测定，且能够识别例如与代谢物等具有类似结构的分子的测定技术。特别是选择性高的三重四极质量分析仪MRM(Multiple Reaction Monitoring、多反应检测仪)模式，其是利用第一阶段的四重极使先导信号通过，该信号在接下来的冲突活化室(collision cell)中分裂，用第二阶段的四重级对生成的化合物所特异性的产品信号进行检测的方法。该方法得到了化合物的特异性质量和价数信息，再用预先添加的已知浓度的内标物质进行修正，从而可对测定对象成分进行相对定量。

公开了应用抗原-抗体反应和质量分析法的专利文献1。这是以蛋白质的定量为目的的。该方法首先要在血清等被检体中添加酶将蛋白质转化为肽。接着，将固定了抗肽抗体的抗体-磁球以及作为测定对象成分的肽中添加经稳定同位素标识过的内标物质，使之反应，使作为测定对象成分的肽及内标物质与抗体-磁球结合。进而，处理后的被检体使测定对象成分得到了浓缩，将其导入至能够利用质量分析检测的装置中，进行肽的定量。该装置的结构为：在前段利用多个阀连接配管，在一部分配管的外侧配置有磁铁。浓缩后的肽利用电喷雾离子化法(ESI)离子化后，用高速液相色谱/质量分析仪(LC-ESI-MS)进行解析。利用该装置能够使与抗体-磁球结合的测定对象物质的浓缩、从抗体-磁球的脱离以及质量分析仪的在线检测成为可能。非专利文献1中，应用抗原-抗体反应和质量分析法，对具有生理活性作用的肽进行解析。使用固定了抗体后的聚苯乙烯珠，与作为测定对象物质的蛋白质结合，进行浓缩。进而，对浓缩的蛋白质进行酶解，切成作为测定对象物质的肽，再利用基质辅助激光脱离子化法(MALDI)进行离子化，用质量分析装置(MALDI-MS)进行解析。在非专利文献2中，抗原-抗体反应及酶解的工序同样利用电喷雾离子化法(ESI)使之离子化，用高速液相色谱/质量分析仪(LC-ESI-MS)进行解析。在酶解之前的工序中使用自动化移液器在例如96孔板内进行处理，试图提高输出量。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：US2008/0217254A1

专利文献2：日本特开平5-80059号公报

非专利文献

非专利文献1：

M.F.Lopez，et.al.，Selected Reaction Monitoring-Mass Spectrometric Immunoassay Responsive to Parathyroid Hormone and Related Variants，Clin.Chem.，56，2，281-290，2010

非专利文献2：

V.Kumar，et.al.，Quantification of Serum 1-84Parathyroid Hormone in Patients with Hyperparathyroidism by Immunocapture In Situ Digestion Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry，Clin.Chem.，56，2，306-313，2010

非专利文献3：