[实用新型]一种检测嗜酸氧化亚铁硫杆菌的胶体金试纸

说明书

技术领域

本实用新型涉及的是检测试纸，具体的是一种检测嗜酸氧化亚铁硫杆菌的胶体金试纸。

背景技术

嗜酸氧化亚铁硫杆菌（Acidithiobacillus ferrooxidans，以下简称A.f）是一种化能自养、专性好氧、嗜酸革兰氏阴性菌，主要生长在pH 1.0～4.5的环境中，以氧化Fe²⁺、S⁰及S^2-的化合物等来获得生长过程所需的能量。该细菌被广泛地应用于生物冶金、有用金属的回收、煤的脱硫及含硫废水的处理，是在资源微生物处理工艺中应用最多、适应性最强的一种细菌。在输水、输油设备、冷却循环水管、采油井、暖气回水管和城市排水管线中均发现有A.f存在，由于A.f能将水中亚铁氧化成高铁氧化物沉积于菌体外鞘或周围粘液层中，在金属表面形成黄褐色的结瘤，结瘤内氧进入困难而导致氧浓差电池腐蚀，进而加速管道腐蚀。此外，A.f还能将水体中的元素硫和还原性硫化物氧化，最终产生硫酸，从而腐蚀金属、混凝土构件等，其腐蚀行为给地下管线、海底电缆、采油设备、工业注水系统等设施带来严重危害，造成经济上的损失。因此人们对其有效检测方法也越来越关注。

目前，A.f存在与否的检测方法主要有培养富集后检测亚铁离子的氧化性能法、多管发酵法、测试瓶法、基于分子生物学技术的检测16S rRNA基因和亚铁氧化酶基因法。这些方法都需要对样品中的A.f进行富集培养，培养基的配置复杂、操作程序繁琐、检测时间长、对测试环境和操作人员的素质要求极高。近年来，不依赖于培养的分子生物学技术也开始应用与A.f的检测，根据16S rRNA基因设计荧光探针，然后通过分子杂交来判断样品中A.f的含有情况。此外，根据铜蓝蛋白（Rusticyanin, 以下简称Rus）编码基因rus建立的含有两对引物的PCR法也被应用于A.f的检测。这两种方法虽然具有一定的灵敏性和特异性，但其试剂配制复杂、对仪器要求高、测试成本高、并且需要专门的技术人员来完成。

Rus是A.f亚铁氧化过程中的一种重要的蛋白，每一分子的蛋白包含一个铜原子，分子量为16.5 kDa。在铁生长环境中A.f菌体内含有高浓度的Rus，可以达到可溶性蛋白总量的5%。从不同A.f菌株中分离的Rus，其氨基酸序列同源性非常高，并且在其它革兰氏阴性细菌中尚未发现有Rus的存在，因此Rus可以作为A.f的一个很好的检测标志。需要发明一种利用Rus蛋白来检测A.f是否存在的装置。

发明内容

本实用新型的发明目的是针对上述问题提供一种检测嗜酸氧化亚铁硫杆菌的胶体金试纸，解决目前检测A.f是否存在的方法过于复杂，成本较高的问题。

本实用新型通过以下技术方案来实现：一种检测嗜酸氧化亚铁硫杆菌的胶体金试纸，该试纸包括塑料底板、微孔滤膜、玻璃纤维素膜、硝酸纤维素膜、滤纸，塑料底板上依次贴有微孔滤膜、玻璃纤维素膜、硝酸纤维素膜和滤纸；所述的玻璃纤维素膜上有胶体金颗粒标记的Rus单克隆抗体Ⅰ，硝酸纤维素膜上有Rus单克隆抗体Ⅱ条带。

上述的硝酸纤维素膜上还有羊抗鼠IgG条带，Rus单克隆抗体Ⅱ条带和羊抗鼠IgG条带平行设置，且Rus单克隆抗体Ⅱ条带位于胶体金颗粒标记的Rus单克隆抗体Ⅰ和羊抗鼠IgG条带之间。

采用上述技术方案的积极效果：本实用新型利用抗原抗体反应和免疫层析技术的原理，将Rus单克隆抗体制备到试纸上，通过Rus单克隆抗体会与Rus结合的特性，通过胶体金颗粒显色，检测出Rus的存在，进而判断A.f是否存在；同时，增加了羊抗鼠IgG条带，可以灵敏地检测出本实用新型是否失效，方便使用。

附图说明

图1是本实用新型的俯视图；

图2是本实用新型的装配示意图。

图中：1塑料底板、2微孔滤膜、3玻璃纤维素膜、4硝酸纤维素膜、5滤纸、6 Rus单克隆抗体Ⅱ条带、7羊抗鼠IgG条带。

具体实施方式：下面结合附图对本实用新型作进一步说明：