[实用新型]高灵敏度显色鲎试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型公开一种高灵敏度显色鲎试剂盒，按国际专利分类表(IPC)划分属于检测试剂盒类制造技术领域，尤其是涉及一种内毒素检测鲎试剂盒。

背景技术

细菌内毒素又称热原，进入人体后会导致机体发生热原反应，严重时引起内毒素血症、内毒素休克，危及生命。鲎试验法是检测细菌内毒素的最佳方法。其原理为鲎试剂中含有对细菌内毒素敏感的蛋白酶系统，此酶系统包含C因子、B因子、凝固酶原及凝固蛋白原等。在细菌内毒素的作用下，C因子活化后引发B因子活化，B因子活化后引发凝固酶原活化为凝固酶，而凝固酶又引发凝固蛋白原活化为凝固蛋白，凝固蛋白最后聚合成凝胶。为了准确定量细菌内毒素，可以在反应体系中加入人工合成的显色基质。此显色基质为凝固酶的底物，在凝固酶的作用下会生成黄色的对硝基苯胺。在一定的时间内，对硝基苯胺的生成量与细菌内毒素浓度成正相关，对硝基苯胺的生成量可以利用光学仪器在OD405nm检测。因此，可以准确定量样品中的内毒素浓度。此方法为显色基质法。显色基质法的灵敏度一般为0.1EU/ml。在应用显色法鲎试剂进行生物样品的内毒素检测时，常常会受到有色样品自身颜色对鲎试验的干扰。如临床上常有的黄疸样品也呈黄色，本底OD值高，无法用显色鲎试剂来检测。

发明内容

针对现有技术的不足，本实用新型提供了一种高灵敏度显色鲎试剂盒，是通过在鲎试剂和细菌内毒素的反应结束后将显色产物对硝基苯胺进行偶氮化反应来实现的，该试剂盒检测细菌内毒素的灵敏度达到0.01EU/ml。

为达到上述目的，本实用新型是通过以下技术方案实现的：

一种高灵敏度显色鲎试剂盒，包括盒体及其内的鲎试剂瓶、细菌内毒素工作标准品瓶、显色基质瓶、两支以上的偶氮化试剂瓶、反应终止剂瓶及细菌内毒素检查用水瓶，显色反应的颜色为玫瑰红色，最高吸收峰为545nm。

进一步，所述的盒体内有二瓶鲎试剂，二瓶细菌内毒素工作标准品，二瓶显色基质， 三组偶氮化试剂瓶，一瓶反应终止剂以及二瓶细菌内毒素检查用水。

进一步，所述的三组偶氮化试剂瓶分别为亚硝酸钠瓶、氨基磺酸铵瓶及萘乙二胺瓶且数量均为二瓶。

进一步，所述显色基质瓶内的显色基质为带有对硝基苯胺基团的三肽或四肽，装量为0.5ml-2.2ml。

进一步，所述的反应终止剂瓶内装有0.48N盐酸，装量为50ml。

进一步，所述的鲎试剂瓶、细菌内毒素工作标准品瓶、显色基质瓶、偶氮化试剂瓶、反应终止剂瓶及细菌内毒素检查用水瓶均为玻璃管制瓶或安瓿瓶。

本实用新型是通过在鲎试剂和细菌内毒素的反应结束后将显色产物对硝基苯胺进行偶氮化反应来实现的，显色反应的颜色为玫瑰红色，灵敏度达到0.01EU/ml，特别适用于临床样品、生物样品及有色样品的细菌内毒素定量法检测。

本实用新型具有如下有益效果：

1、本试剂盒检测细菌内毒素的灵敏度达到0.01EU/ml, 比普通显色法鲎试剂提高10倍；

2、本实用新型显色反应的颜色为玫瑰红色，最高吸收峰为545nm，而不是传统的405nm，避开了大部分生物样品自身颜色对显色法鲎试验的干扰。

附图说明

图1是本实用新型结构示意图。

具体实施方式

下面结合附图对本实用新型作进一步说明：

实施例：请参阅图1，一种高灵敏度显色鲎试剂盒，其盒体1内包含二瓶鲎试剂2，二瓶细菌内毒素工作标准品3，二瓶显色基质9， 二瓶第一偶氮化试剂4，二瓶第二偶氮化试剂5， 二瓶第三偶氮化试剂6，一瓶反应终止剂7， 二瓶细菌内毒素检查用水8，其中

鲎试剂装量为0.5ml-2.2ml，经冷冻干燥后密封于玻璃管制瓶或安瓿中；

细菌内毒素工作标准品，效价为5EU-200EU，经冷冻干燥后密封于玻璃管制瓶或安瓿中；

显色基质为带有对硝基苯胺基团的三肽或四肽，装量为0.5ml-2.2ml，经冷冻干燥后密封于玻璃管制瓶或安瓿中；

第一偶氮化试剂，为0.04%亚硝酸钠，经冷冻干燥后密封于玻璃管制瓶或安瓿中；

第二偶氮化试剂，为0.3%氨基磺酸铵，经冷冻干燥后密封于玻璃管制瓶或安瓿中；

第三偶氮化试剂，为0.07%萘乙二胺，经冷冻干燥后密封于玻璃管制瓶或安瓿中；

反应终止剂为0.48N盐酸，装量为50ml，密封于玻璃瓶中；

细菌内毒素检查用水，装量为50ml, 密封于玻璃瓶中。

本实用新型的使用方法：