[实用新型]甲型肝炎病毒IgM和IgG抗体联合检测试纸

说明书

技术领域

本实用新型是涉及生物应用技术领域，特别是涉及一种以胶体金免疫层析法快速检测甲型肝炎病毒IgM和IgG抗体联合检测试纸 

背景技术

甲型病毒性肝炎(简称甲肝)是由甲肝病毒(HAV)引起的一种病毒性肝炎。甲肝病毒属微小RNA病毒，对各种外界因素有较强的抵抗力而能长期在外界环境中存活，能通过各种污染物品以及水和食物传播，也可经苍蝇携带而传播。人类感染甲肝病毒后，大多表现为亚临床或隐性感染，仅少数表现问急性甲型肝炎。一般可完全恢复，不转为慢性肝炎。 

甲肝主要通过粪-口途径传播，潜伏期15-45天，病毒常在患者转氨酶升高前的5-6天就存在于患者的血液和粪便中。感染后血清中抗-HAV IgM抗体很快出现，在两周左右达高峰，然后逐渐下降，在8周之内消失，是HAV急性感染和近期感染的血清学证据；抗-HAV IgG抗体产生较晚，在急性期后期和恢复期早期出现(IgM开始下降时，IgG逐渐上升)属保护性抗体，在恢复期达高峰，可持久存在，可保护人体不再次感染，对甲肝流行病学调查、健康体检、了解易感人群有重要意义。 

目前对甲型肝炎病毒检测的主要方法是甲型肝炎病毒特异性抗体检测。检测甲型肝炎病毒IgM判定是否为现症感染，检测IgG判定是否曾经感染过，免于再次感染。检测两种抗体有利于对被检对象的进行全面的判定。目前甲型肝炎病毒抗体的检测方法主要是RIA、ELISA等检测方法。在胶体金的检测方法中，有单独检测甲型肝炎病毒IgM或IgG的报道，但用胶体金类免疫层析技术同时检测甲型肝炎病毒IgM和IgG抗体的检测试纸尚未有相关报道。和用两种试剂分别检测IgM和IgG抗体相比，同时检测IgM和IgG抗体能减少检测人员的工作量，节约成本；同时减少采血量，减少患者的痛苦。 

免疫层析胶体金技术是新型的诊断技术，在抗体检测方面已得到较为广泛运用，基本原理如下：利用胶体金标记一种抗原或抗体，在试剂的NC 膜上包被相应的配对抗原或抗体，检测时当样品中含相应的特异性抗体或抗原时，胶体金标记颗粒和样品中配体相结合形成复合物，然后在NC膜上层析，再被包被抗原或抗体捕获，形成肉眼可见的检测T线，通过检测线的有无实现对结果的判定。具有操作简便、反应快速、敏感性高、特异性强、适合现场检测和经济实用等优点。 

发明内容

本实用新型的目的是提供一种甲型肝炎病毒IgM和IgG抗体检测试纸，具有操作简便、反应快速、敏感性高、特异性强、适合现场检测和经济实用等优点。 

本实用新型提供一种甲型肝炎病毒IgM和IgG抗体联合检测试纸，其特征在于塑料支撑板(8)一端粘贴上样垫(1)，上样垫(1)的一端紧密压接含有标记甲型肝炎病毒特异性的抗原VP1或VP3的胶体金垫(2)，胶体金垫(2)一端紧密压接硝酸纤维素NC膜(3)，硝酸纤维素膜包被有相互分离的检测线T1(5)、检测线T2(6)和质控C线，检测线T1(5)为包被在NC膜上的抗人IgM抗体，检测线T2(6)为包被在NC膜上的抗人IgG抗体，质控C线(7)为包被在NC膜上的抗甲型肝炎病毒VP1或VP3抗体，硝酸纤维素膜的另一端连接吸样垫(4)形成试纸。 

所述的甲型肝炎病毒IgM和IgG抗体联合检测试纸，其特征在于所述的抗原甲型肝炎病毒特异性的主要抗原VP1或VP3抗原，抗原可以利用基因工程重组表达或在培养病毒中纯化。 

所述的甲型肝炎病毒IgM和IgG抗体联合检测试纸，其特征在于所述的上样垫(1)为玻璃纤维膜或无纺布，吸样垫(4)由吸水滤纸构成。 

所述的甲型肝炎病毒IgM和IgG抗体联合检测试纸，所述的抗原的包被方法为：以0.01M pH 7.2磷酸盐缓冲液(PBS)将抗人IgM抗体配制成1-2mg/ml的溶液，以0.01M pH 7.2磷酸盐缓冲液(PBS)将抗人IgG抗体配制成1-2mg/ml的溶液，用喷膜仪在NC膜下部以1-1.5ul/cm的参数进行划线，包被T1、T2线，同时在NC膜上部包被抗甲型肝炎病毒VP1抗体作为C线，划线后将NC膜在干燥间，温度20-25℃，湿度小于30％，干燥2-5小时。