[发明专利]四味中药在解除肝肾毒性方面的应用

说明书

技术领域：

本发明属于医药技术领域，涉及四味中药当归、地黄、甘草、黄连在肝肾保护方面的应用，具体涉及四味中药当归、地黄、甘草、黄连混合或单独应用作为解毒药物在制药领域中的应用。

背景技术：

随着人们对中药研究的不断深入，中药的毒副作用也越来越被人们所认识。一方面一些有毒性的中药属于常用中药，如朱砂安神丸的朱砂，一方面朱砂具有镇静安神的药理作用，另一方面朱砂属于重金属，对人体有一定的毒副作用。然而中药的配伍经过历史的证明可以有效的降低原本有毒性药物的毒副作用，成为开发解毒药物的新途径。

发明内容：

本发明的目的在于提供四味中药当归、地黄、甘草、黄连单独使用或混合使用在解除肝肾毒性方面的新用途。

实验方法：

雄性Wistar 大鼠大鼠笼中饲养7天 （控制体重在220±10g），药材提取浓缩后灌胃给药（朱砂：1.8g /Kg/d，当归：1.8g /Kg/d，地黄：1.8g /Kg/d，甘草：0.9g /Kg/d，黄连：2.7 g/Kg/d），每天收集大鼠尿液，共收集8天，每天收集12小时尿液。收集完立即放入-20 ℃冰箱保存。最后一天腹腔取血。尿液样品取上清液按体积比 V/V=1：2加入磷酸盐缓冲液(0.2 mol·LNa₂HPO₄/0.2 mol·LNaH₂PO₄)，静置 10 min. 3000×g条件下离心 10 min，取上层清夜 500 μl置于5 mm核磁管中，取上清液后加入适量 D₂O 和 TSP，使用AVANCE Ⅱ600 MHz型超导傅立叶变换NMR进行测量。

数据经PLS-DA方法分析，由载荷因子图1、3、5、7分别表明测试结果：

1、朱砂单独给药组与空白组相比，大鼠体内柠檬酸盐、酮戊二酸、琥珀酸盐、氧化三甲胺、马尿酸、甲酸盐、乳酸盐的含量降低；牛磺酸、肌酸、肌酸酐、甘氨酸、3-羟基丁酸、醋酸盐的含量升高，提示单独给予朱砂对大鼠的肝肾有一定的毒副作用。

2、朱砂+当归给药组与单独给予朱砂组对比，大鼠体内柠檬酸盐、酮戊二酸、琥珀酸盐、氧化三甲胺、马尿酸、甲酸盐、乳酸盐的含量升高；牛磺酸、肌酸、肌酸酐、甘氨酸、3-羟基丁酸的含量降低，提示与当归共同给药可以对抗单独给予朱砂对大鼠的肝肾所引起的毒副作用。

3、朱砂+黄连给药组与单独给予朱砂组对比，大鼠体内柠檬酸盐、酮戊二酸、琥珀酸盐、氧化三甲胺、马尿酸、甲酸盐的含量升高；肌酸、肌酸酐、甘氨酸、3-羟基丁酸的含量降低，提示与黄连共同给药可以对抗单独给予朱砂对大鼠的肝肾所引起的毒副作用。

4、朱砂+当归给药组与单独给予朱砂组对比，大鼠体内柠檬酸盐、氧化三甲胺、马尿酸、乳酸盐的含量升高；牛磺酸、甘氨酸、3-羟基丁酸的含量降低，提示与当归共同给药可以对抗单独给予朱砂对大鼠的肝肾所引起的毒副作用。

5、朱砂+当甘草归给药组与单独给予朱砂组对比，大鼠体内柠檬酸盐、琥珀酸盐、氧化三甲胺、马尿酸、甲酸盐的含量升高；牛磺酸、肌酸、肌酸酐、甘氨酸、3-羟基丁酸的含量降低，提示与当归共同给药可以对抗单独给予朱砂对大鼠的肝肾所引起的毒副作用。

结果表明四味中药当归、地黄、甘草、黄连对于大鼠的肝肾具有一定的保护作用，可以对抗由朱砂等重金属引起的损伤。

 

附图说明：

图1为朱砂与当归配伍使用与单独给朱砂情况下对小鼠内源性代谢产物的影响的载荷因子图（上）（注：图上数字为核磁共振氢谱的化学位移，具体化学位移所代表的内源性代谢产物已在图上标出）； 

图2为朱砂与当归配伍使用与单独给朱砂情况下对小鼠内源性代谢产物的影响的PLS-DA分组分析图（下）（方块符号代表朱砂组，菱形符号代表空白组，圆形符号代表朱砂+当归给药组，图中表明三组明显在不同区域，说明三组的代谢情况明显不同）； 

图3为朱砂与地黄配伍使用与单独给朱砂情况下对小鼠内源性代谢产物的影响的载荷因子图（上）（注：图上数字为核磁共振氢谱的化学位移，具体化学位移所代表的内源性代谢产物已在图上标出）；

图4为朱砂与地黄配伍使用与单独给朱砂情况下对小鼠内源性代谢产物的影响的PLS-DA分组分析图（下）（圆形符号代表朱砂组，菱形符号代表空白组，方块符号代表朱砂+地黄给药组，图中表明三组明显在不同区域，说明三组的代谢情况明显不同）；