[发明专利]一种检测水痘-带状疱疹病毒抗体的试剂装置及其方法

说明书

技术领域

本发明申请涉及一种检测水痘-带状疱疹病毒抗体的试剂装置及其方法，属于临床免疫学检测技术领域。

背景技术

水痘-带状疱疹病毒(Varicella-Zoster virus，VZV)呈球形，直径为150nm～200nm，完整病毒由核心、核壳和包膜组成。病毒的核心为双链DNA，并有少量的酶蛋白。核壳由162个空心管状壳微粒构成20面体。最外一层是包膜，由脂肪和糖蛋白组成，抗原结构存在于糖蛋白中。

儿童初次感染水痘-带状疱疹病毒时引起水痘，而潜伏体内的病毒受到某些刺激后复发引起带状疱疹，多见于成年人和老年人。水痘发生在儿童常表现为自限性，症状较轻，主要并发症为继发皮肤感染、肺炎、脑炎、心肌炎、肝炎、瑞氏综合征等。但近年来报道了因水痘严重并发症致死的病例，死因分别为出血性水痘、A组链球菌败血症及肺炎伴胸腔积液、链球菌引起的急性心内膜炎。带状疱疹是潜伏VZV再激活感染所致，发病率为总人口数的0.12％～2％，随年龄增长而增高，以致半数以上的病例出现在50岁以上的人群中，带状疱疹的主要并发症是疱疹后神经痛。妊娠期间感染VZV，可危及胎儿和新生儿，对胎儿及新生儿的影响因感染时间不同而异。

水痘-带状疱疹病毒表面存在的多种抗原组分均可激发宿主的免疫应答而诱导抗体产生，检测血清中特异性抗体可以反映病原体的感染情况。水痘-带状疱疹病毒抗体(即血清抗体)主要为IgM和IgG。

临床检测水痘-带状疱疹病毒抗体的常见方法包括间接免疫荧光法、酶联免疫吸附试验的方法，但这些方法都存在着不足之处。

一、间接免疫荧光法

该法的基本原理是用特异性的抗体与载玻片中的抗原结合后形成抗原抗体复合物，继用荧光抗体与抗原抗体复合物结合，形成抗原抗体荧光复合物。在荧光显微镜下，根据复合物的发光情况来确定所检测的抗体。该方法由于结合在抗原抗体复合物上的荧光抗体增多，发出的荧光亮度强，因而其敏感性强。但是其不足也是明显的：

(1)在分析结果时无法根据分子量的大小区分非特异性识别；

(2)操作相对复杂，需要价格较昂贵的荧光显微镜，在很多基层医院难以推广，也不太适用于标本量较多的实验室；

(3)荧光测定中的本底较高，荧光免疫技术用于定量测定有一定困难；

(4)结果判定需要有经验的专业人员，分析结果的客观性不足；

(5)只能进行定性检测，不能进行定量检测。

二、酶联免疫吸附法

酶联免疫吸附法(ELISA)被广泛应用于检测水痘-带状疱疹病毒抗体，但该方法也存在着下述的不足之处：

(1)使用12×8型、6×8型、8×12型或整板型96孔专用微孔板作为抗原包被用具和反应容器，在使用时只能分成12批次、6批次、8批次或整板一次使用，无法进行独立的、单人份的检测；

(2)测定所用的试剂种类较多，每一种检测试剂都要用试剂瓶来盛装，并且每使用一种试剂时都需要更换吸液嘴来分别加注到微孔板的微孔中，不但试剂瓶种类多，加注试剂的操作也极为繁琐；

(3)缺少对检测信息的相应标注，只能通过查看试剂盒外包装盒的标识才能了解或知悉检测试剂的生产批号及有效期信息，而且所知悉的信息在检测过程中不受控，具有很大的随意性；

(4)检测试剂在检测过程中处于开放的空间，容易引起各种试剂之间的交叉污染而影响检测结果的准确性；

(5)检测过程多采用手工操作，试剂或样本的加量不很精确，操作过程极为繁琐和复杂，容易发生操作差错，检测结果的准确度和精密度较差；

(6)在检测项目成套试剂的数量配置及使用上均为项目数×48/96人份，如果需要检测10个项目，则试剂的配置及使用数须为10×48/96人份，如果只有一份样本需要检测10个不同的项目，也需要配置10×48/96人份的试剂，存在着不够经济合理的缺点。

发明内容

本发明专利申请即是针对目前对于水痘-带状疱疹病毒抗体的检测中存在的上述不足之处，提供一种能够进行独立单人份检测的试剂装置及其检测方法。

本发明专利申请基于酶联免疫检测的原理来实现水痘-带状疱疹病毒抗体的检测，是一种独立的、单人份的、一次性的检验方法；进一步的，本发明申请还提供了与该方法配套的相应的试剂装置，该试剂装置水痘-带状疱疹病毒抗体酶联免疫检测所需要的多种试剂盛装在一个独立的、多孔结构的试剂装置内，通过分步加注移弃完成检测步骤；进一步的，所述的试剂装置还可以通过专用的免疫分析仪进行相应的全自动检测。