[发明专利]一种生产纳他霉素的方法及其发酵培养基

权利要求书

1.一种生产纳他霉素的方法，包括发酵纳塔尔链霉菌(Streptomyces natalensis)，其特征在于，在发酵过程中向发酵培养基中添加纳他霉素前体和生物诱导子，所述的纳他霉素前体选自丝氨基酸、丙酮酸和乙酸钾，所述的生物诱导子为灰色链霉菌(Streptomyces griseus)的发酵液。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的纳他霉素前体为5～15mg/l丝氨基酸，1～10mg/l丙酮酸和1～10mg/l乙酸钾；其添加量是0.05～0.5％(V/V)。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的生物诱导子为灰色链霉菌在发酵培养基中26～32℃培养2～5天的发酵液，所述的发酵培养基为每1000毫升中包括葡萄糖5～15g，玉米面1～5g，豆渣1～5g，豆粕1～5g，K₂HPO₄0.1～1g和硫酸镁0.1～1g；生物诱导子的添加量是0.1～2％(V/V)。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的发酵培养基为每1000毫升中包括马铃薯淀粉4～8g，葡萄糖10～20g，花生饼粉1～5g，大豆蛋白胨1～5g，玉米浆1～5g，牛肉膏2～8g，CaCl₂0.5～2g和MgSO₄·7H₂O0.5～2g。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，纳塔尔链霉菌的发酵温度26～30℃，发酵时间4～10天；发酵中纳塔尔链霉菌的接种量是1％～5％(V/V)。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的生物诱导子由包括以下步骤的方法制备而得：

(1)微生物的培养：将固体斜面培养基上的灰色链霉菌(Streptomyces griseus)AS 4.1095接种于液体种子培养基中，26～32℃、100～200r/min培养2～5天；

所述的固体斜面培养基每1000毫升中包括：马铃薯淀粉20～80g，豌豆汁50～100毫升，葡萄糖10～30g和琼脂15～20g；

所述的液体种子培养基每1000毫升中包括：葡萄糖5～15g，玉米面1～5g，豆渣1～5g，豆粕1～5g，K₂HPO₄0.1～1g，硫酸镁0.1～1g，pH 7.0～7.2；

(2)将步骤(1)培养好的培养液，5000～10000rpm离心去菌体，留上清液，然后用微孔滤膜过滤，即得生物诱导子。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，发酵所采用纳塔尔链霉菌种子由包括以下步骤制备：将纳塔尔链霉菌接种于在固体斜面培养基上，26～30℃培养6～10天后，接种于液体种子培养基中，26～30℃培养2～5天；所述的固体斜面培养基为每1000毫升中包括：葡萄糖5～15g，蛋白胨1～10g，牛肉膏1～5g，新鲜麦芽汁50～200ml和琼脂15～20g；所述的液体种子培养基为每1000毫升中包括：葡萄糖10～20g，大豆蛋白胨1～5g，玉米浆1～5g和氯化钠5～15g。

8.一种发酵纳塔尔链霉菌生产纳他霉素的发酵培养基，其特征在于，所述的发酵培养基为每1000毫升中包括：马铃薯淀粉4～8g，葡萄糖10～20g，花生饼粉1～5g，大豆蛋白胨1～5g，玉米浆1～5g，牛肉膏2～8g，CaCl₂0.5～2g和MgSO₄·7H₂O 0.5～2g。

9.如权利要求8所述的发酵培养基，其特征在于，所述的发酵培养基的pH为6.8～7.1。

10.如权利要求8或9所述的发酵培养基，其特征在于，所述的发酵培养基为每1000毫升中包括：马铃薯淀粉5g，葡萄糖15g，花生饼粉2g，大豆蛋白胨2g，玉米浆2g，牛肉膏5g，CaCl₂1g和MgSO₄·7H₂O 1g，灭菌后pH 7.0。