[发明专利]一种AustocystinD冻干粉末及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种冻干粉末及其制备方法，尤其涉及一种来自真菌的山酮化合物Austocystin D的冻干粉末，属医药技术领域。

背景技术

Austocystin D是从真菌的固体发酵产物中分离提纯得到一种山酮类化合物，其结构如下图。

 1974年Steyn PS等首先从曲霉菌发酵产物中分离提纯得化合物Austocystin D，之后关于其活性的报道极少 [Steyn PS，Vleggaar R，J Chem Soc( Perkin I)，1974，19: 2250～2256]。体外实验证明Austocystin D具有良好的抗肿瘤活性，尤其对多药耐药型肿瘤细胞株具有高度的选择性，对MIP101细胞（MDR 1过表达）的活性是SW620细胞（MDR 1不表达）的1000倍左右（IC50，0.001μg/ml vs 0.9μg/ml ）[Chris M. Ireland，William Aalbersberg etal，Pharmaceutical Biology，2003，41:15～38]。作用机理研究证明Austocystin D的细胞选择性需要有细胞色素P450的活化才能实现，通过破坏DNA的结构和功能从而表现出抗肿瘤活性 [Kevin M. Marks，Eun Sun Park etal，Journal of Natural Products. 2011，74(4):567～573]。Austocystin D在体外还表现出很好的抑制血管内皮细胞增殖的活性，可将肿瘤细胞周期阻滞在G1期 [路新华，张华 等，年中国药学会学术年会暨第八届中国药师周论文集，2008]。体内的药效学研究表明给药剂量在3～5mg/kg时Austocystin D能明显抑制裸鼠结肠癌LS174T移植肿瘤的生长，同时还结果显示Austocystin D的治疗指数低，毒性较大 [Chris M. Ireland，William Aalbersberg etal，Pharmaceutical Biology，2003，41:15～38]。

尽管有许多文献报道了Austocystin D的相关作用和特性，但目前尚未检索到有关Austocystin D体内药效学的详细报道。尽管如此，在克服它的毒副作用后，Austocystin D有可能成为一种能够解决多药耐药问题的肿瘤治疗药物。由于Austocystin D为水难溶性化合物，至今尚无关于能够降低其毒性，提高其疗效以及解决其生物利用度低的问题的技术。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有技术之缺陷、提供一种Austocystin D冻干粉末，此外本发明还要进一步提供该冻干粉末的制备方法。

本发明所述技术问题是由以下技术方案实现的：

一种Austocystin D冻干粉末，其主要含有Austocystin D组合物，所述组合物由Austocystin D、磷脂和胆固醇组成，其重量比为1:20～100:2～10。

上述冻干粉末，所述组合物中Austocystin D、磷脂和胆固醇的重量比为1:40～80:4～6。

上述冻干粉末，所述磷脂选自大豆磷脂、卵磷脂或合成磷脂。

上述冻干粉末，其中还含有冻干保护剂，所述冻干保护剂选自乳糖、蔗糖或海藻糖，其重量为磷脂重量的0.2～2倍。 

一种制备上述Austocystin D冻干粉末的方法，它按如下步骤进行：

a．制备磷脂薄膜：取Austocystin D、磷脂、胆固醇，加入无水乙醇溶解，40～50℃、0.05～0.09MPa减压旋蒸40～120min，在烧瓶壁上形成均匀脂膜，备用；

b．水化：加入水化液，振摇，水化成浅黄色混悬液，备用；

c．超声：将步骤b所得混悬液经200W～600W、20～25KHz超声处理4～10min，得Austocystin D混悬液，经0.22μm微孔滤膜过滤，氮气保护下灌封，得Austocystin D组合物混悬液，备用；

d．冻干：向步骤c所得Austocystin D组合物混悬液中加入冻干保护剂冷冻干燥，得本发明所述Austocystin D冻干粉末。

上述制备方法，所述步骤a中，无水乙醇的体积ml为磷脂重量g的30～50倍；所述步骤b中，水化液为注射用水或pH6.8磷酸盐缓冲液，其体积ml为磷脂重量g的10～30倍。