[发明专利]一种检测腮腺炎病毒抗体的试剂装置及其方法

说明书

技术领域

本发明申请涉及一种检测腮腺炎病毒抗体的试剂装置及其方法，属于临床免疫学检测技术领域。

背景技术

流行性腮腺炎(epidemic parotitis，mumps)简称流腮，是儿童和青少年中常见的呼吸道传染病，由腮腺炎病毒所引起。该病毒主要侵犯腮腺，各种腺组织如睾丸、卵巢、胰腺、肠腺、胸腺、甲状腺等均有受侵的机会，也可侵犯神经系统及肝、肾、心脏关节等几乎所有的器官。因此除腮腺肿痛外常可引起脑膜脑炎、睾丸炎、胰腺炎和卵巢炎等症状。孕妇可通过胎盘传染胎儿，导致胎儿畸形或死亡，从而增加流产的发生率。

腮腺炎病毒(Mumps Virus，MV)属于副粘液病毒科，呈球形，直径约为80nm～300nm，是单链核糖核酸病毒(SSRNA)，病毒外膜有血凝素抗原(V)，核壳有可溶性抗原(S)。S抗原和V抗原各有相应的抗体，S抗体有无保护作用尚有争议，V抗体具有保护作用。该病毒只有一个血清型。在自然界中，人是该病毒的唯一宿主。

腮腺炎病毒表面存在的多种抗原组分均可激发宿主的免疫应答而诱导抗体产生，检测血清中特异性抗体同样可反映病原体的感染情况。腮腺炎病毒抗体(即血清抗体)主要为IgM、IgG。

临床检测腮腺炎病毒抗体的常见方法包括放射免疫分析法、实时荧光定量PCR、酶联免疫吸附试验的方法，但这些方法都存在着不足之处。

一、放射免疫分析法

放射免疫分析法是利用同位素标记的与未标记的抗原，同抗体发生竞争性抑制反应，是一种在无须采用生物测定方法的情况下用于检测抗原的实验室测定方法。

该法极其敏感而又极其特异，但其却需要具备尖端复杂的设备，且成本也不低。同时，还需要特殊的预防措施，因为其要用到放射性物质。因此，如今放射免疫分析法在很大程度上已经被ELISA所取代。

二、实时荧光定量PCR

实时荧光定量PCR自问世以来以其高特异性、高灵敏性、可定量、无污染，而得到了广泛的应用。该技术是根据荧光共振能量转移的原理，设计相应的荧光标记核酸探针，通过PCR反应对相应靶DNA进行均相定性定量测定的技术。但该技术也存在下列不足：

(1)由于运用了封闭的检测，减少了扩增后电泳的检测步骤，因此也就不能监测扩增产物的大小；

(2)因为荧光素种类以及检测光源的局限性，从而相对地限制了实时荧光定量PCR的复合式检测的应用能力；

(3)目前实时荧光定量PCR实验成本比较高，从而也限制了其广泛的应用。

三、酶联免疫吸附法

酶联免疫吸附法(ELISA)被广泛应用于检测腮腺炎病毒抗体，但该方法也存在着下述的不足之处：

(1)使用12×8型、6×8型、8×12型或整板型96孔专用微孔板作为抗原包被用具和反应容器，在使用时只能分成12批次、6批次、8批次或整板一次使用，无法进行独立的、单人份的检测；

(2)测定所用的试剂种类较多，每一种检测试剂都要用试剂瓶来盛装，并且每使用一种试剂时都需要更换吸液嘴来分别加注到微孔板的微孔中，不但试剂瓶种类多，加注试剂的操作也极为繁琐；

(3)缺少对检测信息的相应标注，只能通过查看试剂盒外包装盒的标识才能了解或知悉检测试剂的生产批号及有效期信息，而且所知悉的信息在检测过程中不受控，具有很大的随意性；

(4)检测试剂在检测过程中处于开放的空间，容易引起各种试剂之间的交叉污染而影响检测结果的准确性；

(5)检测过程多采用手工操作，试剂或样本的加量不很精确，操作过程极为繁琐和复杂，容易发生操作差错，检测结果的准确度和精密度较差；

(6)在检测项目成套试剂的数量配置及使用上均为项目数×48/96人份，如果需要检测10个项目，则试剂的配置及使用数须为10×48/96人份，如果只有一份样本需要检测10个不同的项目，也需要配置10×48/96人份的试剂，存在着不够经济合理的缺点。

发明内容

本发明专利申请即是针对目前对于腮腺炎病毒抗体的检测中存在的上述不足之处，提供一种能够进行独立单人份检测的试剂装置及其检测方法。

本发明专利申请基于酶联免疫检测的原理来实现腮腺炎病毒抗体的检测，是一种独立的、单人份的、一次性的检验方法；进一步的，本发明申请还提供了与该方法配套的相应的试剂装置，该试剂装置将腮腺炎病毒抗体酶联免疫检测所需要的多种试剂盛装在一个独立的、多孔结构的试剂装置内，通过分步加注移弃完成检测步骤；进一步的，所述的试剂装置还可以通过专用的免疫分析仪进行相应的全自动检测。