[发明专利]一种检测类风湿因子的试剂装置及其方法

说明书

技术领域

本发明申请涉及一种检测类风湿因子的试剂装置及其方法，属于临床免疫学检测技术领域。

背景技术

类风湿因子(RF)是最早发现的自身抗体，以其相关的疾病而得名。RF可见于多种系统性自身免疫病和感染性疾病，也可在健康人群中检测到。

IgG重链恒定区C末端即Fc片段是RF的抗原性位点。RF在健康人群及许多疾病状况下均可呈阳性。未经治疗的类风湿性关节炎患者其阳性率为80％，且滴定度常在1∶160以上。临床上动态观察滴定度多少，可作为病变活动及药物治疗后疗效的评价。其他风湿性疾病如系统性红斑狼疮(SLE)阳性率为20％～25％；硬皮病与皮肌炎阳性率为10％～24％，滴定度较低。RA患者和约50％的健康人体内都存在有产生RF的B细胞克隆，在变性IgG(与抗原结合的IgG)或EB病毒直接作用下，可大量合成RF。健康人产生RF的细胞克隆较少，且单核细胞分泌的可溶性因子可抑制RF的产生，故一般不易测出。

IgM类RF的含量与RA的活动性无密切关系；IgG类RF的含量与RA患者的滑膜炎、血管炎和关节外症状密切相关。IgA类RF见于RA、硬皮病、Felty综合征和SLE，是RA临床活动的一个指标。IgD类RF研究甚少。IgE类RF除RA患者外，也见于Felty综合征和青年型RA。在RA患者，高效价的RF存在并伴有严重的关节功能受限时，常提示预后不良。在非类风湿患者中，RF的阳性率随年龄的增加而增加，但这些人以后发生RA者极少。

临床检测类风湿因子的常见方法包括免疫印迹法、间接凝集反应和ELISA法，但这些方法都存在着不足之处。

一、免疫印迹法

免疫印迹是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。其不足之处在于：

(1)只能进行定性和半定量分析，无法得出被检物质具体的量。

(2)操作步骤繁琐，试验用时较长。

(3)检测的灵敏度还有待提高。

二、间接凝集反应

将可溶性抗原(或抗体)先吸附于适当大小的颗粒性载体的表面，然后与相应抗体(或抗原)作用，在适宜的电解质存在的条件下，出现特异性凝集现象，称间接凝集反应或被动凝集反应。该方法具有快速、敏感、操作简便、无需特殊的实验设备等特点，能用于抗原或抗体的测定。但其特异性差，敏感度较低，且只能做定性检测，不能定量。

三、酶联免疫吸附法

酶联免疫吸附法(ELISA)被广泛应用于检测类风湿因子，但该方法也存在着下述的不足之处：

(1)使用12×8型、6×8型、8×12型或整板型96孔专用微孔板作为抗原包被用具和反应容器，在使用时只能分成12批次、6批次、8批次或整板一次使用，无法进行独立的、单人份的检测；

(2)定量测定所用的试剂种类较多，每一种检测试剂都要用试剂瓶来盛装，并且每使用一种试剂时都需要更换吸液嘴来分别加注到微孔板的微孔中，不但试剂瓶种类多，加注试剂的操作也极为繁琐；

(3)缺少对检测信息的相应标注，只能通过查看试剂盒外包装盒的标识才能了解或知悉检测试剂的生产批号及有效期信息，而且所知悉的信息在检测过程中不受控，具有很大的随意性；

(4)检测试剂在检测过程中处于开放的空间，容易引起各种试剂之间的交叉污染而影响检测结果的准确性；

(5)检测过程多采用手工操作，试剂或样本的加量不很精确，操作过程极为繁琐和复杂，容易发生操作差错，检测结果的准确度和精密度较差；

(6)在检测项目成套试剂的数量配置及使用上均为项目数×48/96人份，如果需要检测10个项目，则试剂的配置及使用数须为10×48/96人份，如果只有一份样本需要检测10个不同的项目，也需要配置10×48/96人份的试剂，存在着不够经济合理的缺点。

发明内容

本发明专利申请即是针对目前对于类风湿因子的检测中存在的上述不足之处，提供一种能够进行独立单人份检测的试剂装置及其检测方法。

本发明专利申请基于酶联免疫检测的原理来实现类风湿因子的检测，是一种独立的、单人份的、一次性的检验方法；进一步的，本发明申请还提供了与该方法配套的相应的试剂装置，该试剂装置将类风湿因子酶联免疫检测所需要的多种试剂盛装在一个独立的、多孔结构的试剂装置内，通过分步加注移弃完成检测步骤；进一步的，所述的试剂装置还可以通过专用的免疫分析仪进行相应的全自动检测。