[发明专利]一种使微生物可同时发酵五碳糖与六碳糖的方法有效
申请号: | 201110448728.7 | 申请日: | 2011-12-28 |
公开(公告)号: | CN103160544A | 公开(公告)日: | 2013-06-19 |
发明(设计)人: | 赵云鹏;姜中人;李泓旻;王祉雯;陈柏庭 | 申请(专利权)人: | 逢甲大学 |
主分类号: | C12P7/02 | 分类号: | C12P7/02;C12P7/40;C12P7/26;C12P19/12;C12P3/00;C12P5/00;C12N1/21;C12R1/19 |
代理公司: | 北京中博世达专利商标代理有限公司 11274 | 代理人: | 申健;王俊民 |
地址: | 中国台湾台*** | 国省代码: | 中国台湾;71 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 微生物 同时 发酵 五碳糖 六碳糖 方法 | ||
1.一种使微生物可同时发酵五碳糖与六碳糖的方法,其特征在于,包含下列步骤:
A.剔除一目标微生物中的一葡萄糖输送酶基因序列;
B.引入一葡萄糖促进基因序列至该目标微生物中;
C.在该目标微生物的至少一五碳糖代谢基因序列上游引入至少一启动子;以及
D.剔除该目标微生物中的至少一有机酸代谢基因序列。
2.根据权利要求1所述的使微生物可同时发酵五碳糖与六碳糖的方法,其特征在于,步骤A所述的该目标微生物可以是一大肠杆菌(Escherichia coli)。
3.根据权利要求1所述的使微生物可同时发酵五碳糖与六碳糖的方法,其特征在于,步骤A所述的该葡萄糖输送酶基因序列可以是一ptsG基因序列。
4.根据权利要求1所述的使微生物可同时发酵五碳糖与六碳糖的方法,其特征在于,步骤B所述的该葡萄糖促进基因序列可以是运动发酵单胞菌(Zymomonas mobilis)的glf(glucosefacilitator gene)基因序列。
5.根据权利要求1所述的使微生物可同时发酵五碳糖与六碳糖的方法,其特征在于,步骤C所述的该至少一五碳糖代谢基因可以是一rpiA、一tktA、一rpe、一talB、或其组合的基因序列。
6.根据权利要求1所述的使微生物可同时发酵五碳糖与六碳糖的方法,其特征在于,步骤D所述的该至少一有机酸代谢基因可以是一ldhA、一pta、一poxB、一frdA、或其组合的基因序列。
7.根据权利要求1所述的使微生物可同时发酵五碳糖与六碳糖的方法,其特征在于,步骤B可以是将该葡萄糖促进基因序列镶嵌入该目标微生物的染色体上。
8.根据权利要求7所述的使微生物可同时发酵五碳糖与六碳糖的方法,其特征在于,是该葡萄糖促进基因序列植入(incorporate)一个质体中,形成一第一重组型质体,再将该第一重组型质体转形(transform)至该目标微生物中表现。
9.根据权利要求5所述的使微生物可同时发酵五碳糖与六碳糖的方法,其特征在于,是将该大肠杆菌的该rpiA基因序列植入(incorporate)一个质体中,形成一第二重组型质体,再将该第二重组型质体转形(transform)至该目标微生物中表现。
10.根据权利要求5所述的使微生物可同时发酵五碳糖与六碳糖的方法,其特征在于,是将该大肠杆菌的该tktA基因序列植入(incorporate)一个质体中,形成一第三重组型质体,再将该第三重组型质体转形(transform)至该目标微生物中表现。
11.根据权利要求5所述的使微生物可同时发酵五碳糖与六碳糖的方法,其特征在于,是将该大肠杆菌的该rpe基因序列植入(incorporate)一个质体中,形成一第四重组型质体,再将该第四重组型质体转形(transform)至该目标微生物中表现。
12.根据权利要求5所述的使微生物可同时发酵五碳糖与六碳糖的方法,其特征在于,是将该大肠杆菌的该talB基因序列植入(incorporate)一个质体中,形成一第五重组型质体,再将该第五重组型质体转形(transform)至该目标微生物中表现。
13.根据权利要求1所述的使微生物可同时发酵五碳糖与六碳糖的方法,其特征在于,进一步包含以下步骤:
E.引入可产生一目标产物的基因序列至该目标微生物中,使该目标微生物可同时发酵五碳糖与六碳糖以产生该目标产物。
14.根据权利要求13所述的使微生物可同时发酵五碳糖与六碳糖的方法,其特征在于,该目标产物可以是醇类、有机酸、双糖、氢气、酮类、烷类、或其组合。
15.根据权利要求1所述的使微生物可同时发酵五碳糖与六碳糖的方法,其特征在于,步骤C所述的该至少一启动子可以是一λPRPL启动子。
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