[发明专利]骨髓间充质干细胞分化诱导过程中的细胞免疫荧光染色方法无效
| 申请号： | 201110448140.1 | 申请日： | 2011-12-27 |
| 公开（公告）号： | CN102533646A | 公开（公告）日： | 2012-07-04 |
| 发明（设计）人： | 陆华 | 申请（专利权）人： | 陆华 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775;C12N5/0793;C12Q1/02;G01N21/64 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 214000 江苏省无*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 骨髓 间充质 干细胞 分化 诱导 过程 中的 细胞 免疫 荧光 染色 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种骨髓间充质干细胞分化诱导过程中的细胞免疫荧光染色方法，其用于骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的全反式维甲酸联合细胞因子诱导过程，所述诱导过程包括分离培养细胞、BMSCs的形态学观察、流式细胞仪检测抗原表达、诱导分化实验以及细胞免疫荧光染色，所述细胞免疫荧光染色方法为：
将培养细胞在诱导分化3天后采用免疫荧光染色；
贴壁细胞去培养基，用PBS洗3次，经4％的多聚甲醛固定30min，PBS洗涤3次，0.3％TritonX-100处理20min，PBS漂洗3次，10％羊血清室温封闭20min，吸出血清，分别加入兔抗人NSE(1∶500)、GFAP(1∶1000)，37℃孵育2h，然后PBS洗3次，加入羊抗鼠-FITC(1∶500)孵30min；以及
显色后在荧光显微镜下观察。
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