[发明专利]异亮氨酸发酵工艺方法

权利要求书

1.一种异亮氨酸发酵工艺，其特征是：它包括如下操作步骤：

（1）培养菌种

选育在含180g/L-220g/L葡萄糖和含30g/L-40g/L异亮氨酸的平板上生长好的高产菌种，在菌种室经扩大培养生产一级种子，然后接入二级种子罐继续扩大培养，该二级种子罐内的二级种子培养基配方为：葡萄糖：2.0-3.5g/L、玉米浆：20-30g/L、磷酸氢二钾：2-5g/L、硫酸铵：20-50g/L、硫酸镁：0.1-0.3g/L、V_H：2.0-6.0μg/L、糖蜜：20-50g/L、硫胺素：400-800μg/L、V_B1：0.1-0.5g/L；每小时二级种子培养基与通入无菌空气通风量的体积比为：1：15-38，二级种子在二级种子罐内经过实消、降温、培养得到的的菌种指标为：△OD≥0.8，革兰氏染色阳性；

（2）发酵

将二级种子培养基液接入装好发酵培养基的发酵罐，发酵培养基与二级种子液的体积比是1:0.10～0.20，该发酵培养基配方为：葡萄糖：150g/L、硫酸铵：40g/L、玉米浆：15g/L、硫酸镁：0.2g/L、磷酸二氢钾：2.0g/L、V_B1：0.15g/L、V_H：2.5μg/L、糖蜜：20g/L、硫胺素：500μg/L；每小时二级种子培养基液及发酵培养基与通入无菌空气通风量的体积比例为1:25～58，连续发酵50小时～60小时，使菌体利用葡萄糖而代谢积累异亮氨酸；

（3）发酵液分离

发酵罐放出的发酵液经降温25-40℃，采用膜过滤处理工艺，在0.2Mpa-0.5Mpa压力下将发酵液中的菌丝体和蛋白分离出来，分离出的菌丝体和蛋白加入5g-20g/L的絮凝剂絮凝，然后在0.1Mpa-0.5Mpa的压力、温度40-60℃下经板框过滤得湿蛋白饲料；

（4）发酵液清液离子交换

发酵液清液经调PH1.5-3.0进入离交柱，在强酸阳离子树脂的作用下，吸附异亮氨酸，树脂吸附饱和时，停止进发酵清液，用氨浓度为0.3-1.0mol/L的洗脱液洗脱树脂吸附的异亮氨酸，洗脱时先流出的为发酵清液，回发酵清液罐，中间流出的为异亮氨酸液进下道工序，最后流出的为尾液，大部分为配制洗脱液回洗脱罐再经冲氨重复使用，离交过程为常温，压力为0.1-0.2Mpa，经离交洗脱下来的液体再经有机浓缩膜在压力0.2-0.5Mpa，温度30-40℃下除去一部分水分，进入蒸发结晶工序；

（5）蒸发结晶

料液进入蒸发结晶器在真空-0.09Mpa，温度小于70℃，通入0.5Mpa饱和蒸汽下，进行浓缩蒸发结晶，浓度后得到的异亮氨酸结晶体经过离心分离除去母液，异亮氨酸结晶体在真空-0.08Mpa，温度小于70℃干燥，然后进入包装工序，包装成成品异亮氨酸。