[发明专利]一种用于检测免疫不育相关自身抗体的新型抗原无效
| 申请号： | 201110435317.4 | 申请日： | 2011-12-22 |
| 公开（公告）号： | CN103175952A | 公开（公告）日： | 2013-06-26 |
| 发明（设计）人： | 兰风华 | 申请（专利权）人： | 兰风华 |
| 主分类号： | G01N33/531 | 分类号： | G01N33/531 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 350025 福建省福州市*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 检测 免疫 不育 相关 自身抗体 新型 抗原 | ||
【权利要求书】：
1.本研究将从人睾丸λTripEx cDNA文库中克隆的人精子特异性乳酸脱氢酶（sperm-specific lactate dehydrogenases, LDH-C4）与高效原核表达载体pET-28a(+)连接，构建了pET-28(a+)-hLDHC重组质粒，将此质粒转化入大肠杆菌Ecol.BL21（DE3）plysS溶原菌中表达，在0.1mM IPTG诱导下可高效表达可溶性的rhLDH-C4蛋白，经Ni+-NTA亲和层析法纯化并用透析带浓缩后，浓度可达1.0mg/ml，1000ml菌液共可获得目的蛋白约1.5mg；以此纯化蛋白作为包被抗原建立人血清抗LDH-C4抗体（IgG型）检测的间接ELISA方法，为准确的检测不育患者体内的自身抗体（LDH-C4抗体）提供一种可靠的临床参考指标；故要求如下：
（1）pET-28(a+)-hLDHC原核重组载体的保存及使用。
2.（2） rhLDH-C4重组蛋白的诱导表达及纯化技术。
3.（3） rhLDH-C4纯化蛋白在临床上的应用以及以此为原料开发新的试剂盒。
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