[发明专利]一种植物RNA提取样品远距离运输的保存方法

说明书

技术领域

本发明属于植物基因工程领域，具体涉及一种植物RNA提取样品远距离运输的保存方法。

背景技术

核糖核酸(缩写为RNA，即RibonucleicAcid)，存在于生物细胞以及部分病毒、类病毒中的遗传信息载体。

RNA酶是一类生物活性非常稳定的酶，除细胞内RNA酶外，环境中的灰尘、各种实验器皿和试剂、人类皮肤的汗液、唾液中均存在RNA酶，且RNA酶耐热、耐酸碱，煮沸也不能使之完全失活，蛋白变性剂可使之暂时失活，但变性剂去除后，又可恢复活性。所以在RNA提取过程中必须避免外源性RNA酶的污染和抑制内源性RNA酶的活性。

鉴于RNA样品易于降解，现有技术中，常常使用液氮速冻RNA保存样品，以备后续试验。但是液氮易于挥发，属于危险用品，难以长距离运输。并且野外操作中，液氮罐比较重，较难携带。

发明内容

本发明的目的在于提供一种植物RNA提取样品远距离运输的保存方法。

为实现本发明的目的，本发明提供一种RNA提取样品远距离运输的保存方法，其为用植物RNA提取裂解液研磨植物材料，并将研磨充分的匀浆注入无RNA酶的样品保存管中，至少4℃以下保存运输。

其中，所述的植物RNA提取裂解液优选为植物RNA提取试剂盒中的裂解液，更优选为Aidlab biotech的Easyspin植物RNA提取试剂盒中的裂解液。

其中，植物材料和裂解液的质量体积比为80～120mg∶0.8～1.2ml。

如果植物材料难以研磨的，可加入常规用量的石英砂促进研磨。

本发明中，将提取RNA的植物材料带到目的地后，立即进行提取或者置于-80℃保存，提取时根据试剂盒说明书进行后续的提取步骤。

本发明的方法无需准备较难运输的液氮，更适于长距离的运输。通过本发明所得到的植物样品尽管在远距离运输的条件下，RNA样品依然无降解或者降解不明显。与用液氮运输这种常规的方法相比，RNA的提取效果相同或相近。而且本发明方法中，研钵无需RNA酶抑制剂处理，清水清洗即可准备下一个样品，操作简单。

附图说明

图1为用本发明方法远距离运输植物样品后的RNA提取图。其中，泳道1～2分别为梅花花瓣和菊花叶片。

图2为用常规的液氮运输法运输植物样品后的RNA提取图。其中，泳道1～2分别为梅花花瓣和菊花叶片。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

实施例1 RNA提取裂解液保存运输

本研究采用Easyspin(Aidlab biotech，北京，中国)植物RNA提取试剂盒的裂解液研磨保存样品，从西藏通麦镇运至湖北武汉。从植物离体至RNA样品提取或超低温保存，历时48h。试验材料为梅花花器官各部分结构及菊花叶片等。

本实施例的具备步骤为：

1)材料准备：

准备无RNA酶的1.5ml的离心管若干、1000μL的移液枪及配套枪头、研钵、研棒、冰盒、冰袋、封口膜；

2)RNA样品处理：

a.野外环境下，干净研钵中注入Easyspin(Aidlab biotech，北京，中国)植物RNA提取试剂中1000μL的裂解液；

b.取100mg左右的植物样品放入研钵中(事先了解该植物样本100mg大约的材料数量)，研棒充分研磨至糊状，对于不易研磨的样品可加入常规用量的石英砂，将样品移入无RNA酶的1.5ml的离心管中，充分震荡混匀，用封口膜封口；

e.将样品置于冰盒中保存，至少保证4℃环境，冰袋在具备条件时冻存备用。冰盒减少开合次数，以保证内部温度，温度越低越便于长距离运输；

c.用清水清洗研钵，纸巾擦净，进行下一个样品的预处理。

到达目的地后，按照说明书的步骤，在进行后续的RNA提取，结果如图1所示。从图1中可以看出，所得到的植物样品尽管在远距离运输的条件下，RNA样品依然无降解或者降解不明显。

实施例2液氮保存运输

用本领域熟知的液氮保存法保存实施例1中所述的植物材料，到达目的地后根据并按照Easyspin(Aidlab biotech，北京，中国)植物RNA提取试剂盒说明书进行RNA提取，结果如图2所示。

从图1和图2的结果来看，这两种提取方式提取的RNA效果相同和相近，表明本发明的方法适合用于长距离运输RNA提取样品。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。