[发明专利]小链霉菌的应用

说明书

技术领域

本发明属于微生物发酵领域，具体涉及小链霉菌(Streptomyces parvus)CGMCC No.4027用于制备arylomycins的应用。

背景技术

Alexandra等在2002年从Streptomyces sp.Tü6075分离得到了两组脂肽类化合物arylomycins，包括arylomycins A和arylomycins B(Schimana，Gebhardt et al.2002)。它们都属于六肽化合物，含有相同肽链(D-Me-Ser-D-Ala-Gly-L-Me-Hpg-L-Ala-L-Tyr)，不同的是，arylomycins B中的Tyr含有-NO₂取代基。

本发明的申请人通过自然筛选的方法获得了一株小链霉菌(Streptomyces parvus)，于2010年7月20日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心正式保藏，保藏单位地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏号为：CGMCCNo.4027。目前对其次级代谢产物的研究较少。

发明内容

本发明的申请人在对小链霉菌(Streptomyces parvus)CGMCC No.4027的代谢产物的研究过程中，分离得到了两种化合物，经结构鉴定为arylomycin A2和arylomycin A4。

因此，本发明的目的在于，提供一种小链霉菌(Streptomyces parvus)CGMCCNo.4027的应用，用于通过发酵制备arylomycin A2和arylomycin A4。

根据本发明的一个优选实施例，所述发酵的种子培养条件为：

培养温度为28～30℃，培养时间为46～50h；

种子培养基组成：葡萄糖2％，可溶性淀粉8％，黄豆饼粉5％，磷酸氢二钾0.02％，pH 7.0～7.5。

根据本发明的一个优选实施例，所述发酵的摇瓶发酵条件为：

发酵温度为28～30℃，发酵时间为4～6天；

发酵培养基组成：黄豆饼粉2.4％，糊精3.2％，葡萄糖0.6％，磷酸氢二钾0.02％，氯化钠0.15％，pH 7.0～7.5。

根据本发明的一个优选实施例，所述发酵的发酵罐发酵条件为：

发酵温度为28～30℃，发酵时间为4～6天；

发酵培养基组成：糊精6％，黄豆饼粉2％，磷酸氢二钾0.02％，氯化钠0.15％，pH 7.0～7.5。

根据本发明的一个优选实施例，所述arylomycin A2和arylomycin A4的制备还包括将发酵液经大孔树脂吸附和制备型HPLC分离的步骤。

本发明的小链霉菌(Streptomyces parvus)CGMCC No.4027可以发酵生产arylomycinA2和arylomycinA4，为arylomycins的制备开辟了一条新途径。

附图说明

图1为arylomycins的结构示意图。

图2为制备液相色谱图。

图3为化合物1的高分辨质谱图。

图4为化合物2的高分辨质谱图。

图5为化合物1的氨基酸分析图。

图6为化合物2的氨基酸分析图。

图7为化合物1的MS/MS谱图。

图8为化合物2的MS/MS谱图。

图9为化合物1的氢谱图。

图10为化合物1的碳谱图。

图11为化合物1的二维谱谱图，其中(a)为cosy谱图，(b)为dept谱图，(c)为HMBC谱图，(d)为HMQC谱图，(e)为TOCSY谱图。

图12为化合物2的氢谱图。

图13为化合物2的碳谱图。

具体实施方式

以下通过具体实施例，对本发明做进一步详细说明。应理解，以下实施例仅用于说明本发明而非用于限定本发明的范围。

本发明所用的菌种为小链霉菌(Streptomyces parvus)，已于2010年7月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏号CGMCC No.4027。

以下实施例中所使用的培养基的配方(w/v)如下：

斜面培养基：可溶性淀粉2％，硝酸钾0.1％，磷酸氢二钾0.05％，氯化钠0.05％，琼脂2％，pH 7.2～7.4。