[发明专利]一种抗肿瘤药物及其佐剂的制备方法

说明书

技术领域：

本发明涉及生物医药技术领域，尤其是一种抗肿瘤药物及其佐剂的制备方法。

背景技术：

聚肌胞为一种干扰素诱导剂。在体内细胞诱导下产生干扰素，有类似干扰素的作用，故有广谱抗病毒和免疫调节功能。用于病毒感染性疾病和肿瘤的辅助治疗。

但是对于新城疫病毒和聚肌胞的结合还没有相关的报道，因此本发明就是针对目前的情况，利用聚肌胞的广谱抗病毒的原理，将聚肌胞设计为一种可有效提高新城疫病毒抗肿瘤效果的佐剂。

发明内容：

本发明的目的是提供一种抗肿瘤药物及其佐剂的制备方法。一种抗肿瘤药物及其佐剂的制备方法，其特征在于：选择健康的鸡胚，接种新城疫病毒；收获病毒NDV尿囊液；将NDV尿囊液进行超滤浓缩；再经过柱层析纯化，然后加入聚肌胞，得到一种新的抗癌药物。本发明的优点在于，加入聚肌胞佐剂可明显提高抗肿瘤药物的抗癌效果。

一种抗肿瘤药物及其佐剂的制备方法如下：

1.佐剂聚肌胞的制备

取注射用水约900ml，搅拌溶解磷酸氢二钠1.55g、磷酸二氢钠0.26g、氯化钠8.77g；将此缓冲液平分成2份，并加热至50℃。一份溶解聚肌苷酸0.49g，另一份溶解聚胞苷酸0.51g；充分溶解后将聚胞苷酸溶液混入聚肌苷酸溶液中，在缓慢搅拌下维持30分钟；冷却至室温，定容至1000ml；0.45μm滤芯过滤，灌封。

2.抗肿瘤药物的制备

(1)鸡胚选择：

选择受精鸡蛋放38℃孵化9天左右，检出死胚和寡蛋；

(2)病毒接种：

新城疫病毒接种的前一天画出气室和接种部位；次日在无菌条件下将鸡胚在接种部位打个小孔；用2ml注射器吸取新城疫病毒的病毒液0.5ml，注入鸡胚内，用石蜡封口；于37℃培养96小时；

(3)收获NDV尿囊液：

在无菌条件下对培养四天的鸡胚进行消毒；用大镊子敲碎蛋壳，用无菌的小镊子扒开囊膜，用无菌吸管吸取NDV尿囊液；收获完的NDV尿囊液收集到一个瓶子里，测效价；

(4)超滤浓缩：

在无菌环境下通过超滤系统对尿囊液超滤浓缩至原来的10倍，其中超滤膜包截留分子量为300KD，膜包0.1m²；

(5)纯化：

在无菌条件下将尿囊液打入层析柱中，通过凝胶过滤层析对尿囊液进行纯化；

(6)加入佐剂：

在无菌条件境下按1∶10的比例加入聚肌胞溶液，混匀。

具体实施方式：

下面结合具体实施例对本发明所述技术方案作进一步的说明

实施例1

一种抗肿瘤药物及其佐剂的制备方法，具体步骤如下：

1、鸡胚选择：

选择受精鸡蛋放38℃孵化9天左右，检出死胚和寡蛋；

2、病毒接种：

新城疫病毒接种的前一天画出气室和接种部位；次日在无菌条件下将鸡胚在接种部位打个小孔；用2ml注射器吸取新城疫病毒的病毒液0.5ml，注入鸡胚内，用石蜡封口；于37℃培养96小时。

3、收获NDV尿囊液：

在无菌条件下对培养四天的鸡胚进行消毒；用大镊子敲碎蛋壳，用无菌的小镊子扒开囊膜，用无菌吸管吸取NDV尿囊液；收获完的NDV尿囊液收集到一个瓶子里，测效价。

4、超滤浓缩：

在无菌环境下通过超滤系统对NDV尿囊液超滤浓缩至原来的10倍，其中超滤膜包截留分子量为300KD，膜包0.1m²；

5、纯化

在无菌条件下将尿囊液打入层析柱中，通过凝胶过滤层析对尿囊液进行纯化。

6、加入聚肌胞：

在无菌条件下按1∶10的比例加入聚肌胞溶液，混匀。

最后所得的制剂即为一种加入佐剂的新型抗癌药物。

实施例2

一种抗肿瘤药物及其佐剂的制备方法，具体步骤如下：

1、鸡胚选择：

选择受精鸡蛋放38℃孵化10天左右，检出死胚和寡蛋；

2、病毒接种：

新城疫病毒接种的前一天画出气室和接种部位；次日在无菌条件下将鸡胚在接种部位打个小孔；用2ml注射器吸取新城疫病毒的病毒液0.5ml，注入鸡胚内，用石蜡封口；于37℃培养96小时。

3、收获NDV尿囊液：

在无菌条件下对培养四天的鸡胚进行消毒；用大镊子敲碎蛋壳，用无菌的小镊子扒开囊膜，用无菌吸管吸取NDV尿囊液；收获完的NDV尿囊液收集到一个瓶子里，测效价。