[发明专利]一种检测多种呼吸道病毒的引物、探针及方法无效
| 申请号: | 201110419283.X | 申请日: | 2011-12-15 |
| 公开(公告)号: | CN102433393A | 公开(公告)日: | 2012-05-02 |
| 发明(设计)人: | 周晓明;胡芸文;张璐;王宏萍;张国翠 | 申请(专利权)人: | 上海市公共卫生临床中心 |
| 主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司: | 上海卓阳知识产权代理事务所(普通合伙) 31262 | 代理人: | 巫蓓丽 |
| 地址: | 201508 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 检测 多种 呼吸道 病毒 引物 探针 方法 | ||
1.一种检测多种呼吸道病毒的引物组合,其特征在于,所述的引物组合是由下列引物对中的一对或几对组成:SEQ ID NO.1-2、SEQ ID NO.3-4、SEQ ID NO.5-6、SEQ ID NO.7-8、SEQ ID NO.9-10、SEQ ID NO.11-12、SEQ ID NO.13-14、SEQ ID NO.15-16、SEQ ID NO.17-18、SEQ ID NO.19-20、SEQ ID NO.21-22、SEQ ID NO.23-24、SEQ ID NO.25-26、SEQ ID NO.27-28、SEQ ID NO.29-30。
2.根据权利要求1所述的引物组合,其特征在于,所述的引物组合是:
(a)引物组合I:SEQ ID NO.1-2、SEQ ID NO.3-4、SEQ ID NO.5-6、SEQ ID NO.7-8和SEQ ID NO.9-10;或
(b)引物组合II:SEQ ID NO.11-12、SEQ ID NO.13-14、SEQ ID NO.15-16、SEQ ID NO.17-18和SEQ ID NO.19-20;或
(c)引物组合III:SEQ ID NO.21-22、SEQ ID NO.23-24、SEQ ID NO.25-26、SEQ ID NO.27-28和SEQ ID NO.29-30。
3.一种检测多种呼吸道病毒的探针组合,其特征在于,所述的探针组合是由核苷酸序列如SEQ ID NO.31~45所示的探针中的一种或几种组成。
4.根据权利要求3所述的探针组合,其特征在于,所述的探针组合是:
(a)探针组合I:SEQ ID NO.31~35;或
(b)探针组合II:SEQ ID NO.36~40;或
(c)探针组合III:SEQ ID NO.41~45。
5.根据权利要求3或4所述的探针组合,其特征在于,所述的核苷酸序列如SEQ ID NO.31~35所示的探针的5’端被6-羧基荧光素所修饰;所述的核苷酸序列如SEQ ID NO.36~40所示的探针的5’端被六氯荧光素氨基磷酸酯所修饰;所述的核苷酸序列如SEQ ID NO.41~45所示的5’端被羧基-X-罗丹明琥珀酰亚胺酯所修饰。
6.一种检测多种呼吸道病毒的方法,其特征在于,它是以呼吸道粘液样本的反转录产物为模板,使用特异性扩增两种或两种以上的呼吸道病毒的引物组合,以及对应的特异性探针组合进行PCR反应,再以反应产物为样品进行微卫星检测。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,它是以呼吸道粘液样本的反转录产物为模板,使用
(a)如权利要求2所述的引物组合I,和如权利要求4所述的探针组合I;或
(b)如权利要求2所述的引物组合II,和如权利要求4所述的探针组合II;或
(c)如权利要求2所述的引物组合III,和如权利要求4所述的探针组合III进行PCR反应,再以反应产物为样品进行微卫星检测。
8.一种检测多种呼吸道病毒的试剂盒,其特征在于,它包括以下试剂:
(a)引物:如权利要求2所述的引物组合I和/或引物组合II和/或引物组合III;
(b)探针:如权利要求4所述的探针组合I和/或探针组合II和/或探针组合III。
9.根据权利要求8所述的试剂盒,其特征在于,它还包括dNTPs、PCR反应液和DNA聚合酶。
10.SEQ ID NO.1~45所示的核苷酸序列在检测呼吸道病毒中的应用。
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