[发明专利]鸡新城疫-H9亚型禽流感二联双佐剂灭活疫苗及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种双佐剂疫苗及其制备方法，尤其是指一种鸡新城疫-H₉亚型禽流感二联双佐剂灭活疫苗及其制备方法。

背景技术

中国是国际公认的养殖大国，但不是养殖强国。动物疫病的防控水平低是制约我国跨入养殖业强国序列的重要限制因素之一。禽流感、高致病性猪蓝耳病、狂犬病等动物或人畜共患病的爆发和流行，不仅使养殖业屡受重创，更引发了国民乃至于国际上对我国公共卫生、食品安全的关注和担忧，由此突显了从根本上提高我国动物疫病防控水平的紧迫性和重要性。

随着我国养鸡业的发展，养殖规模和养殖密度越来越大，鸡群受疫病侵害的危险性也越来越大，据统计，我国家禽的发病率和死亡率在12％～20％以上，高于发达国家4～8倍。家禽传染病的流行一方面给养鸡生产造成了严重的经济损失，影响了农民的经济收入和养殖积极性；另一方面，又会造成鸡肉及相关产品中病原微生物和药物残留，降低肉、蛋品质，威胁人类健康。如何控制畜禽疫病的流行，全面提升动物防疫技术水平，已成为影响养鸡业可持续性发展的主要障碍和瓶颈。鸡的主要病毒性传染病有鸡新城疫(ND)、禽流感(AI)、传染性支气管炎(IB)、减蛋综合征(EDS)、传染性法氏囊(IBD)、马立克氏病(MD)、禽网状内皮组织增生病(RE)、鸡传染性贫血病(CIA)、禽白血病(AL)等，其中大部分是能导致机体免疫抑制的疫病。

鸡新城疫、禽流感是严重威胁养禽业的传染性疾病，高致病性禽流感更是世界养禽业的头号大敌，常常引起感染鸡群的大规模死亡。目前，H₉N₂亚型禽流感已遍布全国。虽然H₉N₂亚型禽流感病毒为低致病力毒株，即使人工感染也不一定引起死亡，但引起的产蛋下降和与其它病原混合感染或继发感染，给我国养禽业造成了巨大损失。对于该病的防治，国内外的研究均表明，用H₉N₂亚型禽流感病毒研制禽流感油乳剂灭活疫苗，可以有效地预防该病。

疫苗是应用病原微生物或其代谢产物等，经过一系列生产工艺而制备的生物制剂，应用于畜禽后可被机体很好地吸收，且无毒、无副作用和有害残留，是一种安全、高效的动物保健制剂，可以广泛用于无公害动物性食品的生产和发展健康养殖业。根据国内外动物疫病防控的实践经验，结合我国的具体国情，应用疫苗进行预防接种，是提高动物疫病防疫水平最为重要的措施之一。当前，多联疫苗已成为动物生物制品行业的研究热点，其中包括鸡新城疫-H₉亚型禽流感(ND-AI(H₉))二联油乳剂灭活疫苗，该二联苗不含活病毒，具有安全性好、免疫持续期长等优点。但是灭活疫苗仅能刺激机体产生体液免疫反应，对细胞免疫刺激作用很小，更不能调节机体的免疫功能。

免疫抑制是指由于各种因素影响，使得机体对抗原的应答能力低下甚至缺失的现象。造成免疫抑制的因素很多，包括疾病、应激、营养等。由病原微生物感染而引起的免疫抑制尤为严重。在禽类，有些免疫抑制性疾病具有明显的临床症状，其危害易被认识到，而有些虽不表现临床症状，但由于免疫抑制使机体免疫力低下，从而造成对多种致病因子易感性增强及疫苗免疫失败。所以，家禽的免疫抑制性疾病不仅因疾病本身造成发病及死亡，同时由免疫抑制造成的一系列恶性结果，给养禽生产带来更大的经济损失。近年来，由于家禽出现的免疫抑制问题越来越多，对免疫增强剂的研究也越来越受到有关专家的重视。现在多数研究着眼于使用各种免疫增强剂来提高机体特异性和非特异性免疫功能、防止免疫抑制的发生。常用的免疫增强剂有盐酸左旋咪唑、硒、福氏佐剂、油佐剂、维生素E、蜂胶、中药制剂(黄芪、党参、香菇等多糖物质)以及细胞因子(转移因子和干扰素、白细胞介素)等。

盐酸左旋咪唑(LMS)是一种广谱高效的抗线虫药物，以后又被发现对机体具有免疫调节作用。LMS的咪唑环可与免疫细胞上的胸腺生成素受体结合，刺激T细胞分化及对抗原的反应，增加干扰素的产量，增强巨噬细胞和中性粒细胞的吞噬作用。盐酸左旋咪唑对于细胞免疫功能受到抑制的动物作用更为明显，能将低下的免疫功能调整到正常水平。所以LMS虽无抗微生物的作用，但可提高鸡对细菌及病毒感染的抵抗力，可使受抑制的细胞免疫功能恢复正常。

目前认为，盐酸左旋咪唑对免疫反应的调节作用与剂量有关，剂量小无免疫调节作用，剂量大不但没有调节作用有时反而有抑制作用，甚至会发生中毒。只有适合的剂量才能增强机体免疫反应。因此，对于不同动物种类、同一动物不同日龄或体重、同一动物不同的使用途径和方法，其使用剂量都有差异，只有经过大量应用试验，方能找出针对某种动物适用的剂量。