[发明专利]一种尖孢镰刀菌芝麻专化型致病力的鉴定方法有效
| 申请号: | 201110412325.7 | 申请日: | 2011-12-12 |
| 公开(公告)号: | CN102487630A | 公开(公告)日: | 2012-06-13 |
| 发明(设计)人: | 苗红梅;仇存璞;魏利斌;杜华;张海洋 | 申请(专利权)人: | 河南省农业科学院 |
| 主分类号: | A01C1/08 | 分类号: | A01C1/08;A01G31/00;C12Q1/02 |
| 代理公司: | 郑州睿信知识产权代理有限公司 41119 | 代理人: | 牛爱周 |
| 地址: | 450002 *** | 国省代码: | 河南;41 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 镰刀 芝麻 专化型 致病 鉴定 方法 | ||
1.一种尖孢镰刀菌芝麻专化型致病力的鉴定方法,其特征在于:通过以下步骤实现:
(1)种子预处理:选取分别具有抗病和感病的2个芝麻品种的健康饱满种子,清水冲洗后,在超净工作台上,先用70%酒精处理30s,无菌水冲洗1次;然后用3%次氯酸钠处理15min,用无菌水冲洗3-5次,之后在120r/min,25℃条件下振荡过夜,以催芽使种子露白;
(2)种子接菌培养:取分生孢子悬浮液,倒入2倍体积的无菌蛭石中混合拌匀,然后按1∶3的体积比例将拌有病原菌的蛭石与无菌土混匀,分装,将步骤(1)已露白的无菌芝麻种子播种在纸钵中,每钵均匀摆放10粒,每个品种种植3个重复,用拌菌的混合土壤轻覆种子表面,放至人工气候箱,25℃,12h/天光暗交替培养,湿度保持在70-90%;
(3)进行致病性鉴定。
2.根据权利要求1所述的尖孢镰刀菌芝麻专化型致病力的鉴定方法,其特征在于:步骤(2)分生孢子悬浮液制备方法为:取出保存的尖孢镰刀菌芝麻专化型菌株接种到PDB液体培养基中,在160r/min,28℃条件下摇菌3d,用两层无菌纱布过滤,制备出尖孢镰刀菌分生孢子悬浮液,用无菌水稀释配制成浓度为1×106个/mL的分生孢子悬浮液,以备接种。
3.根据权利要求1所述的尖孢镰刀菌芝麻专化型致病力的鉴定方法,其特征在于:步骤(2)中分生孢子悬浮液的浓度为1×106个/mL。
4.根据权利要求1所述的尖孢镰刀菌芝麻专化型致病力的鉴定方法,其特征在于:步骤(3)具体步骤为:1)接菌后定期检查每钵幼苗的出苗及生长情况,确保幼苗生长环境正常;2)接菌第21天后调查每钵幼苗的发病情况,记录发病株数及发病等级。
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