[发明专利]改造的mcry2Ab4基因及其应用

说明书

本申请是专利申请号为“2009102420406”发明名称为“改造的Bt基因mvip3Aa11、mcry2Ab4、其基因组合及应用”的分案申请。

技术领域

本发明属于生物防治技术领域，特别是涉及对鳞翅目害虫表达高毒力蛋白的基因组合、人工合成的序列及其应用。

背景技术

虫害是造成农业生产损失的重要因素之一。据统计，虫害每年给农业生产造成的直接经济损失高达15％。化学杀虫剂曾对虫害防治、稳定农业生产做出过重要贡献。随着人们对化学杀虫剂环境危害的认识、环保意识的日益加强，为了实现农业可持续发展，全球都在积极探索新的害虫防治途径。

苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis，Bt)是一种广泛分布于土壤中的革兰氏阳性细菌，它在芽胞形成期产生的杀虫晶体蛋白(Insecticidal Crystal Proteins，ICPs)是Bt杀虫的主要活性成分，ICPs通过作用于昆虫中肠而导致昆虫死亡(Hofte H.Microbiology Review，1989，53：242-255；Agaisse H.Journal of Bacteriol.，1995，177，6027-6032)。由于ICPs对鳞翅目(Lepidoptera)、鞘翅目(Coleoptera)、双翅目(Diptera)、膜翅目(Hymenoptera)等多种重要的农林业害虫均具有毒杀作用，目前Bt已经成为研究最为深入、应用最广的杀虫微生物(SchnepfN.Microbiol and Molecular Biology，1998，62(3)：775～806)。而转Bt杀虫晶体蛋白基因抗虫植物成功商业化已经有12年，获得了巨大的社会、经济和生态效益(Clive James，ISAAA 2008，Briefs 39，Global Status of Commercialized Biotech/GM Crop)。

但是，在实际应用中，第一代转基因作物如抗虫棉、抗虫玉米等，由于单一的使用cry1类基因(cry1Ab，cry1Ac)，害虫在田间对cry1A基因的抗性频率和抗性风险随着产业化的面积和时间增加而呈现不断上升的趋势(李国平，中国农业大学博士学位论文，2006)。因此，寻找与Cry1类(Cry1Ab，Cry1Ac)具有不同受体的杀虫蛋白和杀虫蛋白的组合，对克服和延缓害虫抗性产生具有极其重要的理论意义和实用价值。