[发明专利]肥荚红豆种子无菌诱导植株再生的方法及其专用培养基

权利要求书

1.肥荚红豆种子无菌诱导植株再生的专用培养基，其特征在于，所述的专用培养基是由以下配方的种子萌发培养基，增殖培养基和生根培养基组成：

（1）种子萌发培养基的配方是：Read基本培养基+6-BA0.2～1mg/L+NAA0.02～0.1 mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5 g/L,  Ph=5.8；

（2）增殖培养基的配方是：Read基本培养基+6-BA0.5～1.5mg/L+KT0.05～0.1 mg/L+ NAA0.05～0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5 g/L,  Ph=5.8； 

（3）生根培养基的配方是：Read基本培养基+ IAA0.5～1.5 mg/L+ 蔗糖30g/L+琼脂6.5 g/L,  Ph=5.8。

2.根据权利要求1所述的肥荚红豆种子无菌诱导植株再生的专用培养基，其特征在于：

（1）种子萌发培养基的配方是：Read基本培养基 + 6-BA 0.5 mg/L + NAA 0.05 mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L,  Ph=5.8；

（2）增殖培养基的配方是：Read 基本培养基+ 6-BA 1 mg/L + KT 0.1 mg/L + NAA 0.1 mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L,  Ph=5.8；

（3）生根培养基的配方是：Read基本培养基+ IAA 1.0 mg/L+ +蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L,  Ph=5.8。

3.肥荚红豆种子无菌诱导植株再生的方法，其特征在于，按以下步骤进行：

（1）种子消毒与处理

将肥荚红豆种子用0.12%氯化汞溶液浸泡12～18min，再用2%次氯酸钠溶液浸泡8～12min后，用清水漂洗，之后放入3MNaOH溶液浸泡40～80min，再用清水漂洗后取出，剥去种皮；

（2）种子萌发

将经步骤（1）消毒与处理的种子接种于种子萌发培养基，培养24～30天；所述的种子萌发培养基的配方是权利要求1所述的（1）种子萌发培养基的配方；

（3）不定芽增殖

将步骤（2）种子萌发诱导出来的芽从豆瓣上分离，整棵或切成带节的茎段转移到增殖培养基上，培养40天；所述的增殖培养基的配方是权利要求1所述的（2）增殖培养基的配方；

（4）生根

将步骤（3）培育的增殖苗分棵切开，接种于生根培养基，培养24～31天；所述的生根培养基的配方是权利要求1所述的（3）生根培养基的配方；

（5）炼苗与移栽

待步骤（4）的小苗长出4～6条主根时，将培养瓶移至室外大棚内，于透光率为70%的遮阳网下炼苗，3～7天取出小苗，洗去根部培养基，移栽到穴盘中，穴盘中基质为按腐叶土：红土：珍珠岩=2～3.5：1～2：0.5～1的体积比比例混合而成的混合物，穴盘放置于育苗小棚内，棚顶覆盖一层透光率60%的遮阳网，第8天揭去遮阳网，保持基质的土壤质量含水量为40-50%；

上述步骤（2）～步骤（4）的培养条件：培养温度22～25℃，光照时间12 h/d，光照强度1500～2000lx。

4.根据权利要求3所述的肥荚红豆种子无菌诱导植株再生的方法，其特征在于，按以下步骤进行：

（1）种子消毒与处理

将肥荚红豆种子用0.12%氯化汞溶液浸泡15min，再用2%次氯酸钠溶液浸泡10min后，用清水漂洗，之后放入3MNaOH溶液浸泡60min，再用清水漂洗后取出，剥去种皮；

（2）种子萌发

将经步骤（1）消毒与处理的种子接种于种子萌发培养基，培养24天；所述的种子萌发培养基的配方是权利要求2所述的（1）种子萌发培养基的配方；

（3）不定芽增殖

将步骤（2）种子萌发诱导出来的芽从豆瓣上分离，整棵或切成带节的茎段转移到增殖培养基上，培养40天；所述的增殖培养基的配方是权利要求2所述的（2）增殖培养基的配方；

（4）生根

将步骤（3）培育的增殖苗分棵切开，茎基部切平，接种于生根培养基，培养24天；所述的生根培养基的配方是权利要求2所述的（3）生根培养基的配方；

（5）炼苗与移栽

待步骤（4）的小苗长出4～6条主根时，将培养瓶移至室外大棚内，于透光率为70%的遮阳网下炼苗，于7天取出小苗，洗去根部培养基，移栽到穴盘中，穴盘中基质为按腐叶土：红土：珍珠岩=3.5：1：0.5的体积比比例混合而成的混合物，穴盘放置于育苗小棚内，棚顶覆盖一层透光率为60%的遮阳网，第8天揭去遮阳网，保持基质的土壤质量含水量为40～50%；

步骤（2）～步骤（4）的培养条件：培养温度是22-25℃，光照时间是12 h/d，光照强度是1500-2000lx。