[发明专利]啤酒有害菌检测专用培养基

说明书

技术领域

本发明涉及到一系列啤酒有害菌检测专用培养基，属于微生物发酵领域。

背景技术

啤酒有害菌的存在给啤酒工业造成巨大的损害。啤酒有害菌包括乳酸菌、野生酵母等，其中以乳酸菌最为常见，危害也最大。对啤酒有害菌的检测，普遍采用培养基检测技术，检测时间较长，一般需要5-7天，不能够及时反馈微生物的污染状况。同时国内啤酒和国外啤酒相比有自己的特点，趋向于淡爽化，浓度较低，苦味质很降，意味着国内啤酒对啤酒有害菌的抑制能力较差，同时由于气候和地理环境的差异，我国的啤酒有害菌分布也有自己的特点，很多在国外没有出现的有害菌在中国也有发现，很多在国外经常出现的严格厌氧菌在国内很少报道。因此需要针对中国啤酒的特点和微生物检测现状开发出适合自己的检测培养基，达到高效快速的检出目的。

目前啤酒行业检测啤酒有害菌的培养基，如NBB、MRS等都是依靠进口，对于我国作为世界上连续8年世界啤酒生产第一的地位不对称，由于国内啤酒的特点与国外啤酒不一样，如国外啤酒的苦味值比较高，而苦味值高能够抑制啤酒有害菌的生长，同时又由于国内啤酒趋向于淡爽化方面，且啤酒浓度较低，我国当前啤酒原麦汁浓度主要以7-8度为主，而国外原麦汁浓度基本在11度以上，啤酒浓度越高，意味着酒精度越高，其对啤酒有害菌的抑制能力越高，综上所述，基于国内啤酒的特点所对应生产的啤酒有害菌的种类和数量与国外啤酒有害菌可能存在一定程度的差异，因此开发适合国内啤酒特点有害菌培养基是必要的。

发明内容

本发明解决的技术问题就是针对中国啤酒的有害菌特点，开发出检出率高，检测速度快的培养基系列。该系列培养基有三种配置形式，一种是液体培养基，第二种是在液体培养基的基础上添加琼脂而成的固体培养基，第三种是在液体培养基的基础上浓缩型而成的浓缩培养基，这三种形式的培养基配方和制作方法如下：

培养基A型(固体型)：

蛋白胨：8-12g，牛肉浸粉：6-10g，酵母膏：4-6g，葡萄糖：15-25g，吐温80：1-3ml，无水磷酸氢二钾：1-3g，三水乙酸钠：4-6g，柠檬酸三铵：1-3g，MgSO₄7H₂O：0.1-0.4gMnSO₄4H₂O：0.05-0.06g，麦根浸出物，0.2-1g，精氨酸：0.5-0.75g，叶酸：0.2-0.4g，天然蜂蜜(不含防腐剂)：10-20g，琼脂粉：20g，放线菌酮：5-10mg。

加入放线菌酮以抑制酵母生长，将以上试剂溶解在0.4L水中，再加入0.5L啤酒，用1N HCL调整pH至5.6，再补足水至1L。121度高压灭菌。冷却后备用。该型培养基用于倾倒平板使用。

培养基B型(液体型)：

蛋白胨：8-12g，牛肉浸粉：6-10g，酵母膏：4-6g，葡萄糖：15-25g，吐温80：1-3ml，无水磷酸氢二钾：1-3g，三水乙酸钠：4-6g，柠檬酸三铵：1-3g，MgSO₄7H₂O：0.1-0.4gMnSO₄4H₂O：0.05-0.06g，麦根浸出物，0.2-1g，精氨酸：0.5-0.75g，叶酸：0.2-0.4g，天然蜂蜜(不含防腐剂)：10-20g，放线菌酮：5-10mg，氯酚红：0.05-0.07g。

将以上试剂溶解在0.4L水中，再加入0.5L啤酒，用1N HCL调整pH至5.6，再补足水至1L。121度高压灭菌。冷却后备用。加入放线菌酮以抑制酵母生长，加入氯酚红可以提供颜色指示，当有害菌生长时，培养既可由红色变成黄色。该培养基应用于对设备表面的棉签擦拭等应用。

培养基C型(浓缩型)：

蛋白胨：40-60g，牛肉浸粉：30-50g，酵母膏：20-30g，葡萄糖：75-125g，吐温80：5-15ml，无水磷酸氢二钾：5-15g，三水乙酸钠：20-30g，柠檬酸三铵：5-15g，MgSO₄7H₂O：0.5-2g MnSO₄4H₂O：0.25-0.3g，麦根浸出物：1-5g，精氨酸：2.5-37.5g，叶酸：1-2g，天然蜂蜜(不含防腐剂)：50-100g，放线菌酮：5-10mg。

将以上试剂溶解在0.4L水中，再加入0.5L啤酒，用1N HCL调整pH至5.6。115度高压灭菌10分钟。冷却后备用。加入放线菌酮以抑制酵母生长，该浓缩培养基可用于酵母泥和浑浊发酵液的检测使用。