[发明专利]一种检测玉米赤霉烯酮的试剂盒

说明书

技术领域

一种检测玉米赤霉烯酮的试剂盒，属于酶联免疫吸附分析 (ELISA)技术领域，用于对谷物中玉米赤霉烯酮（简称ZEN)含量的检测。

背景技术

ZEN是一种雌激素真菌毒素，由禾谷镰刀菌（F.graminearum)、三线镰刀 菌（F.tricinetum)、尖孢镰刀菌（F.oxysporum)、黄色镰刀菌（F.culmorum)、串珠镰刀 菌（F.oeniliforme)、木贼镰刀菌（F.eguiseti)、燕麦镰刀菌（F.avenaceum)、雪腐镰刀菌 (F.nivale)等多种菌种代谢产生。玉米赤霉烯酮其主要存在于玉米和玉米制品中，小麦、大麦、高梁、大米中也有一定程度的分布，其主要污染小麦、大麦、燕麦、小米、芝麻、干草和青贮饲料等。玉米赤霉烯酮具有较强的生殖毒性和致畸作用，可引起动物 发生雌激素中毒症，主要症状有阴道和乳腺肿胀、子宫肿大、外翻、导致动物不孕或流 产，对家禽特别是猪、牛和羊的影响较大，给畜牧业带来经济损失；玉米赤霉烯酮可直 接通过污染的谷类等作物进入人和动物体内，亦可通过被污染的肉、奶等动物性食品进 入人体，它引起人中毒的症状主要出现无力、头痛、头晕、呕吐、腹泻和中枢神经系统 的紊乱。因此为了保障人们的健康，开展食品中ZEN的卫生检测研究是很有必要的。

欧盟委员会规则856/2005号规定了谷物食品和谷物中玉米赤霉烯酮的最大限量，20-100ug/kg，于2006年7月1日生效。目前也有许多国家制定了玉米赤霉烯酮的限量标准，奥地利规定小麦、裸麦、硬质小麦中不得超过60ug/kg，巴西、法国、罗马 尼亚、俄罗斯、乌拉圭等国也制定了限量标准。修订的《粮食卫生标准》规定小麦、玉米中ZEN的限量为60ug/kg。

我国玉米赤霉烯酮污染较重地区主要集中在东北冷湿储粮生态区和华东热湿储 粮生态区。谷物在耕作、收获、储藏期间，若湿度较高，温度适宜25-28°C，镰刀菌可不 断增殖，而且在较低温度下12°C左右或温度高低变化的情况下，玉米赤霉烯酮毒素都可产生。

目前玉米赤霉烯酮的检测方法主要有：色谱技术和免疫分析技术。色谱技术 (HPLC、GC-MS、LC-MS)由于费时，花费多，在实际应用中受到一定限制，通常作 为确定性的定量检验方法；免疫分析技术（ELISA)是常用的现场抽样快速筛选检验方 法。国外的酶免试剂盒有德国R-Biopharm (检测范围50-4050ppt)、美国Neogen (检测范围25-600ppb)、Beacon (检测范围20-1000ppb)等公司生产的ZEN-ELISA检测试剂盒。但由于进口试剂盒价格昂贵，在一定程度上限制了它的使用范围。国内有研制的ZEN-ELISA试剂盒，其最低检出浓度为lug/L(ppb)，标准曲线的线性范围为 1-200 ug/L。检测的灵敏度和试剂的稳定性不够，所以需要建立高灵敏的ZEN的检测。

发明内容

本发明的目的在于提供一种检测玉米赤霉烯酮的试剂盒，用于对谷物中玉米赤霉烯酮含量的检测。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种检测玉米赤霉烯酮的试剂盒，包括盒体和盒内的一块24孔ZEN包被反应板，一个反应盖板，14瓶试剂和放试剂的下凹瓶位，一个冰袋，一个框架，一份说明书，一包吸水纸，2支一次性滴管和一份质检报告，其特征在于：包被反应板是采用24孔试剂板作为固相载体，14瓶试剂分别6瓶ZEN标准品溶液、酶标二抗、ZEN抗体、抗体稀释缓冲液、样品稀释液、浓缩洗涤液、底物液、显色液、终止液，下凹瓶位共16个。

盒体是硬纸盒；24孔的ZEN包被反应板，放于真空铝箔袋内；框架为白色48孔塑料框架，框架孔大小与AFM₁包被反应板微孔大小相配；反应盖板是塑料硬盖，大小与框架大小相配；ZEN标准品溶液均用黑色帽的棕色玻璃瓶，酶标二抗用绿色帽的棕色玻璃瓶，ZEN抗体用白色帽的白色PE塑料瓶，抗体稀释缓冲液用绿色帽的白色PE塑料瓶，样品稀释液用兰色帽的白色PE塑料瓶，浓缩洗涤液用白色帽的白色PE塑料瓶，底物液用蓝色帽的白色PE塑料瓶，显色液用黑色帽的黑色PE塑料瓶，终止液用黄色帽的白色PE塑料瓶；下凹瓶位由塑料泡沫制成。

 本发明的有益效果是：该试剂盒结构简单，使用方便、廉价、灵敏度高，达到 0.05ng/ml。

附图说明

图1是本发明的外观示意图。

具体实施方式

具体检测步骤如下：