[发明专利]凝乳酶的制备方法有效
| 申请号： | 201110381424.3 | 申请日： | 2011-11-27 |
| 公开（公告）号： | CN102382808A | 公开（公告）日： | 2012-03-21 |
| 发明（设计）人： | 甘伯中;高维东;纪银莉;宋礼;何潇;张玉平;唐兴宇 | 申请（专利权）人： | 甘肃华羚生物技术研究中心;甘肃农业大学 |
| 主分类号： | C12N9/58 | 分类号： | C12N9/58;C12R1/645 |
| 代理公司： | 兰州振华专利代理有限责任公司 62102 | 代理人： | 张真 |
| 地址： | 730000 *** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 凝乳 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1. 一种凝乳酶的制备方法，其特征是包括以下步骤：
（1）米黑毛霉菌株:购自ATCC美国模式培养物集存库，菌种编号NO.26282 Rhizomucor miehei；
（2）制备液体菌种：称取20-40g的麸皮煮沸8-12分钟，用四层纱布过滤，滤液用水定容至1000mL,取250mL装进500mL三角瓶，棉塞封口，121℃灭菌20分钟；冷却后，接种1环米黑毛霉孢子，33℃培养2天；
（3）液体菌种接种麸皮培养基：175g麸皮，加入150-210mL水，搅拌均匀，121℃灭菌25分钟，冷却后，接种液体种子，接种量20-60mL，25℃-50℃培养3天；
（4）浸提：1公斤发酵产物加入9%的氯化钠水溶液20升，室温浸提4 -12小时；
（5）离心：用80-150目滤布的板框压滤，过滤液用离心机8000-10000rpm转速离心，收集上清液，即为粗酶液。
2.如权利要求1所述的凝乳酶的制备方法，其特征是还包括以下步骤：
（6）超滤：取10升离心液，通过截留量为8k-10k的超滤膜，废弃透析液，当酶液体积为1升-2升，停止超滤，浓缩比例5-10倍；
（7）干燥：1升超滤液添加氯化钠50-100g，甘露醇30-60g，真空冷冻干燥72小时，得凝乳酶成品。
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