[发明专利]一种1号染色体替换实验小鼠品系C57BL/6-Chr1NZW的构建

说明书

技术领域

本发明属小鼠品系的构建领域，特别是涉及构建一种1号染色体替换实验小鼠品系C57BL/6-Chr1^NZW。

背景技术

从医学角度而言，后基因组时代最主要的挑战是解析导致人类常见疾病或称复杂性状疾病发生及个体间差异的分子多态性，复杂性状相关基因的研究是这一时期的核心任务。目前已经定位到了3000多个QTL，但明确鉴定的复杂性状调控基因却只有20个左右。为了应对复杂性状相关基因研究的挑战，克服目前复杂性状相关基因精细定位的难题，欧美等发达国家正在探索研发新的小鼠遗传资源。至今美国、日本及捷克等国科学家构建了小鼠全基因组染色体替换品系，实验小鼠近交系A/J、CAST/Ei、MSM/Ms、PWD/Ph等全基因组染色体被逐一引进受体品系C57BL/6小鼠基因组中。但由于染色体替换品系构建上存在技术难度，近交系NZW还未被引进受体品系C57BL/6小鼠基因组中。

C57BL/6是近交系中使用最广泛的品系，第一个高质量的小鼠基因组序列草图是通过C57BL/6绘制的。其基因信息明确、生育力强，广泛应用于重大疾病的研究。具有以上优势，C57BL/6小鼠是染色体替换研究的最佳背景之一。供体品系选择与国外研究不重复，序列信息已知，且供体品系间遗传距离较远。

NZW品系特征：①免疫：具有淋巴细胞表面同种抗原(Thy-1，2)。NZW与NZB杂交仔鼠B/WF1(NZB×NZWF1)，有处发的类似狼疮性肾炎、红斑狼疮细胞阳性和抗核抗体阳性。是研究人类系统性红斑狼疮疾病的最好动物模型。②寄生虫：对利什曼原虫感染敏感。③生理：112日龄平均体重雌雄分别为30和35克。平均生存期两性均约为630日。④病理：13月龄鼠开始发生肾小球肾炎。

鉴于C57BL/6小鼠基因信息明确，有必要以之作为背景，通过染色体替换试验，来研究NZW小鼠各染色体及其上的基因的功能，因此克服技术难度以获得引进了NZW小鼠染色体的C57BL/6小鼠品系是首要的。

发明内容

本发明的目的在于构建一种染色体替代实验小鼠品系C57BL/6-Chr1^NZW。

在本发明的第一方面，提供一种1号染色体替换实验小鼠品系C57BL/6-Chr1^NZW的建立方法，所述方法包括：

(1)以NZW品系小鼠作为母本、C57BL/6品系小鼠作为父本进行杂交，获得F1代小鼠(包括雄性小鼠和雌性小鼠)；

(2)将F1代雄性小鼠与C57BL/6品系雌性小鼠杂交，获得回交一代小鼠；该回交小鼠中，NZW品系小鼠中的性染色体和线粒体DNA被替换为C57BL/6品系小鼠中的性染色体和线粒体DNA；使用多核苷酸多态性(SNP)位点鉴定该雄性回交小鼠的1号染色体，选择1号染色体多核苷酸多态性位点鉴定结果为NZW品系小鼠所特有的雄性回交小鼠；使用短串联重复序列(STR)位点鉴定选择到的雄性回交小鼠，选择1号染色体短串联重复序列位点鉴定结果为NZW品系小鼠所特有的回交小鼠；

(3)将选择到的雄性回交小鼠与C57BL/6品系雌性小鼠杂交，获得下一代回交小鼠；

(4)使用多核苷酸多态性(SNP)位点鉴定雄性回交小鼠的1号染色体，选择1号染色体多核苷酸多态性位点鉴定结果为NZW品系小鼠所特有的雄性回交小鼠；使用短串联重复序列(STR)位点鉴定选择到的雄性回交小鼠，选择1号染色体短串联重复序列位点鉴定结果为NZW品系小鼠所特有的回交小鼠；

(5)重复步骤(3)～(4)5-50次(例如：8、9、10、15、20、30、40次)；从而获得染色体替代动物品系，其以C57BL/6品系小鼠为背景，且其1号染色体被NZW品系小鼠的1号染色体替换。

在一个优选例中，所述的1号染色体的多核苷酸多态性位点(参见MGI数据库中，记载了两个品系的多核苷酸多态性位点信息，http://www.informatics.jax.org/javawi2/servlet/WIFetch？page＝snpQF)包括：

rs31426703，其在1号染色体上所处位置为chr1：12720994；在NZW品系小鼠染色体相应位置的碱基为C，在C57BL/6品系小鼠染色体相应位置的碱基为T；

rs31928308，其在1号染色体上所处位置为chr1：28659508；在NZW品系小鼠染色体相应位置的碱基为A，在C57BL/6品系小鼠染色体相应位置的碱基为G；