[发明专利]黄鳝血清转铁蛋白及其制备方法与用途

权利要求书

1.黄鳝血清转铁蛋白的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)血清的制备：取黄鳝新鲜血液在10℃～25℃下静置1～2h沉淀，得深红色块状物质；然后将血液在0～4℃下静置12～24h后离心，弃去血细胞，取上清液即血清；

(2)球蛋白的提取：将步骤(1)得到的血清用盐析法提取，取沉淀；以0.008～0.015mol/L、pH值6.8～7.2的磷酸盐缓冲液溶解沉淀，再逐滴加入0.8～1.2倍体积的饱和盐溶液，摇匀，在0～4℃静置，沉淀为蛋白粗提物；

(3)将蛋白粗提物溶解并透析后用离子交换柱层析纯化，以0.01～0.1mol/L、pH值6.8～7.2的磷酸盐缓冲液梯度洗脱，分段收集洗脱液，合并洗脱峰。

2.权利要求1所述黄鳝血清转铁蛋白的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述的离子交换柱的层析介质为DEAE-纤维素或阴离子交换树脂；

层析介质用起始缓冲液充分平衡、装柱；所述起始缓冲液为pH值6.8～7.2、0.008～0.012mol/L的磷酸盐缓冲液。

3.权利要求1或2所述黄鳝血清转铁蛋白的制备方法，其特征在于，步骤(3)中蛋白粗提物用pH值6.8～7.2、0.008～0.012mol/L的磷酸盐缓冲液溶解和在0～10℃透析后，用离子交换树脂层析纯化。

4.权利要求1所述黄鳝血清转铁蛋白的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述饱和盐溶液为饱和硫酸铵、饱和辛酸-硫酸铵或饱和硫酸钠溶液。

5.权利要求1所述黄鳝血清转铁蛋白的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述盐析提取方法为：向血清中逐滴加入0.8～1.5倍的饱和盐溶液，混合均匀，于0～10℃静置，使充分沉淀，冷冻离心，弃去上清，取沉淀。

6.一种黄鳝血清转铁蛋白，其特征在于，通过权利要求1～5任一项所述的方法制备，所得蛋白的分子量为74KD，该蛋白的二级结构中含α-螺旋29.8％，β-折叠6.6％。

7.权利要求6所述黄鳝血清转铁蛋白在制备抗菌剂方面的应用。

8.权利要求6所述黄鳝血清转铁蛋白在制备治疗帕金森病药物方面的应用。

9.权利要求6所述黄鳝血清转铁蛋白在制备治疗免疫增强剂方面的应用。