[发明专利]一种蓟柄锈菌的离体保存方法无效
申请号: | 201110369158.2 | 申请日: | 2011-11-11 |
公开(公告)号: | CN102391952A | 公开(公告)日: | 2012-03-28 |
发明(设计)人: | 时焦;张峻铨;徐宜民;刘少云 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院烟草研究所 |
主分类号: | C12N1/04 | 分类号: | C12N1/04;C12R1/645 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 266101 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 锈菌 保存 方法 | ||
1.一种蓟柄锈菌的离体保存方法,其特征在于,按照下述步骤操作:
a、制备夏孢子粉,
b、取一种固体颗粒,并在其表面喷洒一层1%羧甲基纤维素钠水溶液,然后滚上一层夏孢子粉
c、A粉包衣10~15层,形成以固体颗粒为核心的颗粒,
d、B粉包衣次外层,
e、滑石粉包衣最外层,
f、晾干并贮藏。
步骤a为:从田间人工采集感染了蓟柄锈菌的小蓟植株,然后在室内进行单孢纯化,人工接种小蓟,使小蓟感染蓟柄锈菌。然后用手术刀从发病的小蓟叶片上刮取成熟的夏孢子,将刮取的夏孢子与其3~5倍重量分数的A粉混合制成夏孢子粉。
2.根据权利要求1所述蓟柄锈菌的保存方法,其特征在于,步骤b为:
用天平称取与夏孢子粉等重量的固体颗粒,然后在颗粒表面喷洒质量分数比为1%羧甲基纤维素钠水溶液,充分搅拌使羧甲基纤维素钠水溶液均匀地分布在颗粒表面;将颗粒与夏孢子粉混合,并滚动颗粒,直至所有的夏孢子粉全部均匀滚粘在颗粒的表面。
3.根据权利要求2所述蓟柄锈菌的保存方法,其特征在于,步骤c为:
再次在颗粒表面喷洒质量分数比为1%羧甲基纤维素钠水溶液,喷后在颗粒表面再滚粘上A粉1层;上述操作重复10~15次,直至粘有A粉的颗粒,能够通过8目~10目的筛孔为准,粘有A粉的颗粒要求大小均匀。
4.根据权利要求3所述蓟柄锈菌的保存方法,其特征在于,步骤d为:
在步骤c所得颗粒表面喷洒质量分数比为1%羧甲基纤维素钠水溶液,再均匀滚粘上B粉1层。
5.根据权利要求4所述蓟柄锈菌的保存方法,其特征在于,步骤e为:在步骤d所得颗粒表面喷洒质量分数比为1%羧甲基纤维素钠水溶液,再均匀的滚粘上滑石粉,使颗粒表面形成滑石粉层。
6.根据权利要求5所述蓟柄锈菌的保存方法,其特征在于,步骤f为:过筛,选取通过了8目~10目的颗粒,并在室内室温下晾干20~28小时;将晾干的颗粒装入离心管中并封闭离心管,于4℃和-20℃冰箱保存。
7.根据权利要求1所述蓟柄锈菌的保存方法,其特征在于,所述A粉的成分为:金叶牌烟草包衣剂型号A,其由六和农业科学研究所生产。
8.根据权利要求1所述蓟柄锈菌的保存方法,其特征在于,所述B粉的成分为:金叶牌烟草包衣剂型号B,其由六和农业科学研究所生产。
9.根据权利要求1所述蓟柄锈菌的保存方法,其特征在于,蓟柄锈菌夏孢子经本发明保存方法保存120天时,其萌发率高于80%。
10.根据权利要求2所述蓟柄锈菌的保存方法,其特征在于,所述固体颗粒的大小为40~50目,所述固体颗粒为灭活的烟草种子、油菜种子、大白菜种子或硅胶颗粒中的任一种。
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