[发明专利]针对可溶型LOX-1的单克隆抗体

说明书

(本申请是2009年3月27日递交的发明名称为“针对可溶型LOX-1的单克隆抗体”的申请200780036077.2的分案申请) 

技术区域 

本发明涉及与作为氧化低密度脂蛋白(以下称为“氧化LDL”)受体的凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1(Lectin-like oxidized low density lipoprotein receptor-1)(以下称为“LOX-1”)的一部分断裂产生的可溶型分子(以下称为“可溶型LOX-1”)具有特异性亲和性而结合的单克隆抗体，以及产生该抗体的杂交瘤。本发明还涉及该单克隆抗体的用途。 

背景技术

从不稳定心绞痛到急性心肌梗塞，再到在合并有不稳定心绞痛和急性心肌梗塞的心脏性猝死的一系列病态，概括地称为急性冠脉综合征(ACS)。其均为由向心脏供给营养的冠状动脉的动脉硬化所生成的粥样斑(斑块)崩解、在其上附着血栓，结果产生冠状动脉狭隘和闭塞而发病的。在现代社会，急性冠脉综合征逐渐增加，但由于大部分患者没有任何先兆而突然发病，所以，大多数无法急救而突然死亡。另外，即使在迅速被送到医院的情况下，为了抢救，大多必须进行紧急的经皮经管冠状血管形成手术(PCI)，其医疗经济上的负担不可估计。 

近年来逐渐明确，急性冠脉综合征的发病起因于粥样动脉硬化斑块的破损或糜烂而持续产生的闭塞性血栓形成(非专利文献1)。虽然已经显示在斑块的破损、糜烂时，在血管壁内的炎症反应、氧化应激反应起着重要作用，但在其中，已知由受到氧化变性的LDL(低密度脂蛋白)所引起的、以蛋白酶活性增加和凋亡(细胞死亡)为中心的血管壁功能障碍是其主要原因。LOX-1是作为该氧化LDL的受体蛋白质被鉴定的物质(非专利文献2)。已知该LOX-1在机体内通常作为膜 蛋白质而在细胞表面表达，但由蛋白酶的作用，在跨膜部分附近的细胞外结构域被切断而作为可溶型(soluble)LOX-1在血中游离(非专利文献3)。另外，由于在急性冠脉综合征的急性期，该可溶型LOX-1的血中浓度显著上升，所以有报告其作为急性冠脉综合征的初步诊断标记物的可能性(非专利文献4)。 

因此，可以说如果能够在早期阶段正确地定量在血中存在的可溶型LOX-1量，就能够预先防止急性冠脉综合征(ACS)。另一方面，虽然有关于针对LOX-1的抗体的报告，但都停留在一般的记载，目前的现状是，能够在实现上述目的的ELISA等免疫化学测定系统中使用的具有高亲和性的单克隆抗体尚没有报告(专利文献1～3)。 

非专利文献1：Medical Tribune，1999，Vol.32，No.31，p.6 

非专利文献2：Nature，1997，Vol.386，p.73-77 

非专利文献3：Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.，2000，20(3)，p.715-720 

非专利文献4：Circulation，2005，112(6)，p.812-818 

专利文献1：日本特开平9-98787号公报 

专利文献2：日本特开2000-109435号公报 

专利文献3：日本特表2002-510710号公报 

发明内容

本发明的目的在于提供一种特异性识别并结合作为人氧化LDL受体的LOX-1的可溶型分子的人可溶型LOX-1的单克隆抗体，特别是与人可溶型LOX-1的解离常数为1×10^-9(M)以下的、对人可溶型LOX-1具有高亲和性的单克隆抗体。另外，本发明的目的还在于提供该单克隆抗体的用途，例如，提供利用了该抗体具有的对人可溶型LOX-1的特异亲和性和结合性的免疫学试剂(例如，人可溶型LOX-1的特异性结合试剂或特异性检测试剂)、和利用了该试剂的人可溶型LOX-1的特异性且高灵敏度的检测方法。 

本发明的目的还在于，通过检测或定量在血中存在的人可溶型LOX-1，提供诊断以心肌梗塞为代表的急性冠脉综合征的方法、以及评价急性冠脉综合征的治疗药物及其辅助药物的药效的方法。 

通过使用上述单克隆抗体检测或定量在血中存在的人可溶型LOX-1，急性冠脉综合征的诊断和针对急性冠脉综合征的被试验药物的药效评价能够比以往方法容易而且早期地进行。因此，本发明的目的还在于提供单克隆抗体在这样的急性冠脉综合征的诊断和药效评价中的用途。