[发明专利]腔肠素的合成方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种腔肠素的合成方法，属于生物化学合成技术领域。

背景技术

腔肠素（coelenterazine）是一种萤光素，可发光，是许多萤光素酶和光蛋白的底物，广泛存在于水生生物体内，在生物发光体系中占有非常重要的地位。萤光素和萤光素酶或光蛋白组合一直被用来研究基因在多种生物体中的调节和表达。

现有的腔肠素技术合成步骤冗长，操作麻烦，收率低，且成本较高，仅适用于实验室合成而不适用于工业化生产。鉴于腔肠素的巨大用途及需求量的日益增加，同时目前的市场供应远远不能满足需求，因此，寻找优化的腔肠素合成路线就成为当务之急。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足之处，提供一种简便易行的腔肠素的合成方法。

本发明的腔肠素的合成方法包括下列步骤：

1）以化合物A和化合物B为原料，在吡啶和TiCl₄下缩合关环，得到化合物C，反应过程如下式：

2）化合物C经氢化还原脱氧，得到化合物D，反应过程如下式：

3）化合物D与吡啶盐酸盐在200℃下脱甲基得到化合物E，反应过程如下式：

4）化合物E和对羟苯基丙酮酸经缩合关环，得到产物G，即腔肠素，反应过程如下式。

本发明具有如下技术效果：本发明提供了优化的合成腔肠素的方法，经过四步反应，较简便的路线合成了腔肠素，本发明公开了一种较为优化的腔肠素合成的方法，本发明所用原料价廉易得，成本较低，实验步骤操作简单，并且各步骤的收率较高，适合于工业化放大生产。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步描述，但不应以此限制本发明的保护范围。

实施例1    化合物C的合成

将化合物A （90g，0.493mol)和化合物B（9.7g，0.493mol),溶于吡啶（700mL）中，于-10度下搅拌30min,缓慢滴加TiCl₄(214克，1.13mol) 于反应瓶中，滴加完毕，继续搅拌1小时，至室温，再搅拌2小时。然后，反应液倒入冰水中，加入稀盐酸调节pH值为4左右，用乙酸乙酯萃取，干燥，旋干，得黄色固体130克，收率86%。产品可直接投入到下一步反应中。

实施例2    化合物D的合成

将化合物C（130克，0.423mol）溶于甲醇（1500mL）中，加入Raney Ni（15克），氢气氛围下，搅拌15小时，反应完毕，抽滤，所得滤液旋干，得化合物D（115克），收率93%。

实施例3    化合物E的合成

将化合物D（14g, 0.0481mol）和吡啶盐酸盐（56g, 0.484mol）放入250 mL的烧瓶中，搅拌均匀，氮气保护，于200 ^oC下反应1小时。反应完毕，倒入冰水中，用EA萃取，干燥，柱层析，得化合物E（10克），收率75%。

实施例4    化合物G（腔肠素）的合成

    化合物E（10克，0.036mol）和对羟苯基丙酮酸（16.2克，0.09mol）溶于甲醇中，于100^oC加热搅拌反应一小时，然后旋去甲醇，混和物于150 ^oC下反应一小时，反应完毕，混和物柱层析，得化合物G（腔肠素）(9.1克，收率60%)。