[发明专利]一种抗乙肝的药用组合物及其制备方法、用途

说明书

技术领域

本发明涉及一类以类核苷(酸)抗病毒药物和冬虫夏草为活性成分的药用组合物及其制备方法、用途，属于医药技术领域。

背景技术

全球约有3.5亿人感染乙型肝炎病毒(HBV)。目前抗HBV的主要药物有拉米夫定、阿德福韦酯等，对慢性乙型肝炎都有一定疗效，但单一用药疗效不理想。

拉米夫定、阿德福韦酯、替比夫定、替诺福韦、恩替卡韦为核苷(酸)类似物，可通过影响乙肝病毒多聚酶活性抑制其复制，是目前治疗慢性乙型肝炎较为有效的药物，但拉米夫定等核苷(酸)类似物只能阻断细胞内HBV-DNA的逆转录过程，对细胞内游离HBV基因模板——共价闭合环状DNA毫无影响，因而拉米夫定等核苷(酸)类似物只能抑制而不能根除乙肝病毒，虽然具有较高的HBV-DNA阴转率，但HBeAg阴转率不高，一旦停药可有反弹，故需长期服用，而长期服用又易发生耐药性变异。

HBV对抗病毒药物的耐药分为表型耐药和基因型耐药。表型耐药是指在治疗期间病毒水平上升，一般用抗病毒药物浓度(IC50)测定，IC50增加说明药物敏感性下降或耐药程度增加，需要更大的药物剂量才能抑制变异的病毒。基因型耐药是指病毒聚合酶基因突变，形成新的病毒基因序列，一般采用DNA测序、基因芯片等方法测定。发生变异的病毒常可改变其生物学特性，给慢性乙型肝炎防治带来一系列问题。因此加强HBV变异的研究，具有重要的生物学及临床意义

HBV对拉米夫定耐药是HBV DNA聚合酶突变所致。耐药基因位点(YMDD)位于聚合酶的C区(rtM2041或rtM204V)，分别是YMDD中的蛋氨酸(M)被异亮氨酸(I)或缬氨酸(V)所替代，形成YIDD或YVDD变异，这两种变异分别是HBV基因组第739位碱基腺嘌呤被鸟嘌呤取代(A→G)和第741位碱基鸟嘌呤被胸腺嘧啶取代(G→T)。拉米夫定作用靶位为HBV DNA聚合酶C区。有研究表明，拉米夫定与HBV逆转录酶的亲和力与位于第552位氨基酸侧链长度有关，异亮氨酸和缬氨酸取代蛋氨酸，使侧链氨基酸长度缩短，使逆转录酶dNTP结合区增大，不适于拉米夫定结合，从而诱发耐药性。此外，位于逆转录酶B区第528位亮氨酸被蛋氨酸取代(L528M)，可增加HBV的复制能力和耐药性。

拉米夫定所诱导的YMDD变异的比例随着服药时间的延长而增加，第1年、2年、3年、4年的耐药发生率分别为14％、38％、49％和66％。当变异株成为优势株时，就可能出现耐药，病毒重新活跃复制，病毒载量升高。

阿德福韦酯是第一个核苷酸类似物，它的二磷酸结构形式能直接抑制DNA聚合酶，进而抑制HBV复制。它的抗病毒作用位点不同于拉米夫定，这也是HBV对阿德福韦酯与拉米夫定不具有交叉耐药的理论基础。阿德福韦酯的抗病毒疗效与拉米夫定类似，只是在初始阶段病毒负荷下降的速度较慢。在长期接受阿德福韦酯治疗的病例中也发现了耐药变异株(N236T或A181V)，但其发生率很低。对于HBeAg阳性病人，应用阿德福韦酯1年、2年、3年时耐药发生率分别为0、1.6％和3.1％。HBeAg阴性患者1年、2年、3年的耐药发生率分别为0、3.0％和5.9％-11％。所有拉米夫定耐药株对阿德福韦酯均敏感，而阿德福韦酯耐药株对拉米夫定也敏感。到目前为止，还没有发现同时对这两种抗病毒药物都耐药的病毒株。

根据阿德福韦酯初始治疗作用慢、耐药率低的特点，比较适用于肝脏基础稍差的病人，能尽可能减少因病毒变异所造成的病情反复。正是由于阿德福韦酯有这样的特点，不适合用于因病毒复制所致的重症肝炎病人，在替代拉米夫定治疗YMDD变异株时，要与拉米夫定重叠使用1-3个月，根据病毒和肝功能的情况调整治疗。

恩替卡韦是环氧羟碳脱氧鸟苷，三磷酸结构形式的恩替卡韦主要通过抑制病毒聚合酶的引导、从前基因组到负链的逆转录和DNA正链合成。恩替卡韦可抑制耐拉米夫定毒株的复制，但抗病毒活性降低。体外实验表明，拉米夫定耐药株对恩替卡韦的敏感性低于野毒株，HBV变异位点为rt184、rt202、rt250，可能是通过限制恩替卡韦与HBV多聚酶的结合从而导致耐药发生。恩替卡韦对不同变异病毒株抗病毒活性降低程度不同，对M204I变异株要求恩替卡韦浓度增高(约30倍)。III期临床研究结果显示，对发生YMDD变异者将恩替卡韦剂量提高至每日1mg能有效抑制HBV DNA复制。对初治患者治疗1年时对恩替卡韦的耐药发生率为0，但对已发生YMDD变异患者治疗1年时的耐药发生率为5.8％，只有在感染拉米夫定耐药变异株的病人，才会出现恩替卡韦耐药表型。