[发明专利]一种复合芽孢杆菌粉活菌含量的快速计数方法有效
申请号: | 201110347608.8 | 申请日: | 2011-11-07 |
公开(公告)号: | CN102392070A | 公开(公告)日: | 2012-03-28 |
发明(设计)人: | 何珊;曹海鹏;卫若鹏 | 申请(专利权)人: | 山西卫氏鱼康实业有限公司;山西省生物兽药饲料工程技术研究中心(有限公司) |
主分类号: | C12Q1/06 | 分类号: | C12Q1/06 |
代理公司: | 山西五维专利事务所(有限公司) 14105 | 代理人: | 杨耀田 |
地址: | 044100 山西省运*** | 国省代码: | 山西;14 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 复合 芽孢 杆菌 粉活菌 含量 快速 计数 方法 | ||
1.一种复合芽孢杆菌粉活菌含量的快速计数方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)样品的制备:无菌操作随机称取复合芽孢杆菌粉1g,加入盛有9mL无菌营养肉汤的50mL具塞离心管中,于漩涡振荡仪上振荡混匀制成1∶10的稀释母液;
2)样品的稀释:无菌操作用1mL玻璃移液管吸取1mL 1∶10的稀释母液,加入盛有9mL无菌营养肉汤的50mL具塞离心管中,混匀成1∶102的稀释液,这样依次稀释,分别得到1∶103、1∶104、1∶105、1∶106、1∶107、1∶108、1∶109、1∶1010、1∶1011、1∶1012、1∶1013稀释度的稀释液;
3)培养:将1∶10的稀释母液以及1∶102、1∶103、1∶104、1∶105、1∶106、1∶107、1∶108、1∶109、1∶1010、1∶1011、1∶1012、1∶1013的稀释液置于转速为200r/min、温度为35~37℃的温控摇床中,培养18-24h;以盛有9mL无菌营养肉汤的50mL具塞离心管作为对照;
4)测定:以盛有9mL无菌营养肉汤的50mL具塞离心管作为对照,用1mL玻璃移液管无菌操作吸取0.1mL培养18-24h变浑浊的各稀释液采用Schaeffer-Fulton氏染色法进行芽孢染色,显微镜观察有无绿色的芽孢;显微镜观察有绿色芽孢、且变浑浊的稀释液所对应的稀释度的倒数即为复合芽孢杆菌粉的活菌含量。
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