[发明专利]油菜蜂花粉长链脂肪酸及其衍生物的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于中药制药领域，具体涉及油菜蜂花粉长链脂肪酸及其衍生物的制备方法。

背景技术

国内外临床实践均证明花粉及其制剂是治疗前列腺疾病的理想药物。李永辉(李永辉.青菜花粉抗前列腺增生的药效物质基础研究.上海医药工业研究院硕士学位论文(D)，2009)针对文献报道有抗前列腺增生物活性的油菜蜂花粉、青菜花粉、玉米花粉、松花粉和向日葵花粉。研究结果显示：油菜蜂花粉具有很强的抗前列腺增生作用，确定了油菜蜂花粉抗前列腺增生的最佳有效成分为脂肪酸类和黄酮类。在药效筛选研究过程中，发现花粉二氧化碳超临界提取物具有良好的抗前列腺增生活性。并经GC-MS分析，显示脂肪酸类化合物是二氧化碳超临界提取物的主要化学成分，且以棕榈酸和亚麻酸及其衍生物含量最高。文献(朱刚，王建业，刘俊达，等.雌雄激素对前列腺基质细胞增殖的影响[J].中华泌尿外科杂志，2000，21(6)：361-363.)报道亚麻酸具有抗5-还原酶和抗前列腺增生的活性，因此本研究对花粉中的活性成分亚麻酸和主要成分棕榈酸进行定量分析，为花粉药材和提取物的质量控制提供参考。

中国发明专利申请：CN 101347490 A(杨义芳，李坤，李永辉：“一种油菜破壁花粉提取物及其提纯方法和应用”)公开了一种油菜破壁花粉的提纯方法及制备的提取物，该提纯方法包括将油菜破壁花粉采用超临界二氧化碳萃取的萃取物用大孔树脂富集，采用乙醇洗脱，收集洗脱液，且该方法提取的有效成分具有较佳的抗炎活性以及抗前列腺增生，抗前列腺纤维化等前列腺疾病的功效。中国发明专利申请：CN 101933947 A(杨义芳，杨必成，金丽丽：“一种在蜂花粉中提取脂肪类化合物的方法”)公开了一种采用超临界二氧化碳萃取法从蜂花粉中提取脂肪类化合物的方法，其显著提高了制得的提取物中的脂肪酸类化合物的含量。

按照专利CN 101933947 A公开，油菜蜂花粉水洗离心后的膏体需要干燥到含水量≤质量百分比10％，才能进行超临界萃取，该申请中公开的真空干燥和喷雾干燥方法，经过试验发现小剂量的样品可以迅速干燥，但是试验量上升到千克级别后真空干燥样品呈流体状，试验时间延长3倍以上，干燥完后样品呈浅黄或黑色，色泽不均匀；喷雾干燥样品干燥不均，干燥完后花粉湿度大与百分之十，需反复操作，干燥时间大大延长。用真空干燥和喷雾干燥来干燥花粉水洗浸膏实验设计不周密使得实验误差加大，操作不具有可控性，不适于工业化生产。

另一方面，油菜蜂花粉超临界提取物中主要成分为长链脂肪酸及其衍生物，但是也含有大量无效成分的化合物，不宜于直接开发作新药，按照专利CN 101347490 A公开的纯化长链脂肪酸及其衍生物的方法得到的化合物，经过药效学实验证明对前列腺疾病有很好的疗效，其中主要包括亚麻酰胺，亚麻酸甘油酯，亚麻酸乙酯，月桂酸，亚麻酸，10-甲氧基-1-十七烷烯-4，6-二炔基-3，9-二醇，鲽油酸，二十碳二酸，12-甲基-肉豆蔻酸甲酯，亚麻酸，油酸，漆树酸A，豆甾醇阿魏酸酯等长链脂肪酸及其衍生物，但是因为长链脂肪酸及其衍生物的本身特性，油菜蜂花粉超临界提取物极其不容易挂柱上样，有效成分洗脱后因为极性更小的非有效成分还残留在柱子上，不容易洗脱下来，不能直接进行下一批生产，所以用大孔树脂富集有效成分不适合于工业化生产。

发明内容

鉴于上述现有技术中的缺陷，本发明提供一种新颖的油菜蜂花粉长链脂肪酸及其衍生物的制备方法，该方法不仅能使油菜蜂花粉水洗离心后浸膏干燥后易于存放、尽可能减少花粉易于引起过敏的过敏原，使有效药物的适用范围扩大，而且能将药物有效成分尽可能多的提取出来。本发明所述油菜蜂花粉长链脂肪酸及其衍生物的制备方法的可控性强，能耗低，污染小，成本低，利于工业化生产。

本发明以油菜蜂花粉水洗离心后得到的浸膏为研究对象，提供一种油菜蜂花粉长链脂肪酸及其衍生物的制备方法，包括以下步骤：

a)提供油菜蜂花粉水洗离心后的浸膏；

b)用微波真空干燥上述浸膏；

c)进行超临界萃取，得到超临界萃取物；

d)用C1-C5的醇类或其水溶液提取上述超临界萃取物，得到油菜蜂花粉长链脂肪酸及其衍生物。

根据本发明，a)步骤中提供油菜蜂花粉水洗离心后的浸膏是现有技术，可按照专利申请CN 101933947A公开的方法制备，具体步骤如下：称取粉碎后的油菜蜂花粉2000克置于桶内搅拌，加入蒸馏水12L，室温搅拌4小时后，置于离心机中以5000r/min离心20分钟，倾去上清液，之后将离心浸膏干燥至含水量小于4％。