[发明专利]一种克服美洲黑杨×中国山杨杂交障碍的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种克服美洲黑杨×中国山杨杂交障碍的方法。

背景技术

杨属树种根据形态特征、地理分布和杂交亲合力分为5派即：白杨派(Leuce或Poplus)、黑杨派(Aigeiros)、青杨派(Tacamahaca)、大叶杨派(Leucoides)、胡杨派(Turanga)，白杨派又分为白杨亚派、山杨亚派，但种内变异丰富，种间天然和人工杂种较多，使得杨树不同派间或种间的亲缘关系不同，亲缘关系较近的杨树之间容易杂交，而亲缘关系较远的杨树存在杂交障碍。Willing R.R和Pryor L.D.(1976年)研究了多种杨树的种间杂交后，认为青、黑、大叶杨三派之间可配性高，容易杂交，而白杨派与其它四派可配性差，很难杂交，胡杨派亦然。

但由于白杨派、黑杨派两派间许多经济性状优缺点互补，因此有必要通过杂交等手段，把两派间的优良性状集于一体，获得黑白杨优良杂种无性系。国内外不少育种学家对黑白杨之间杂交进行研究，国外研究的主要有Knox等(1972年)所做的美洲黑杨×欧洲山杨杂交，几乎没有得到种子。Guris和Stelttler(1976年)做了28个组合的杨树杂交试验，发现美洲山杨与黑杨、青杨杂交严重不亲合，授粉12h后，仅有少数花粉萌发。他们还发现美洲黑杨的花粉管不能进入美洲山杨的柱头，而是在其表面扭曲生长。Ronald(1982年)用5种白杨作母本，做了58个组合的杨树派间杂交试验，发现用原种白杨作母本的大多数组合，花粉发芽率低，而用杂种白杨作母本的组合，花粉发芽率相对较高，所得杂种在形态上介于两亲本之间，能扦插生根。Rougier(1992年)研究美洲黑杨×银白杨，发现花粉管长到花柱底部就出现沉积现象。国内这方面的工作主要有，徐纬英(1988)用母本花粉的糖蛋白处理柱头技术做了银白杨×欧洲黑杨、毛白杨×欧美杨等组合的杂交，但是幼胚仍然败育。张金风等(1999年)进行了21个杂交组合白杨与黑杨派间杂交试验，结果表明，白杨派与其它派杂交没有获得苗木。张金风等(2000年)利用黑杨与青杨的杂种作为中介亲本，成功地得到了杨树派间杂种。

目前，急需一种有效地克服杨树派间、杨树派内种间杂交不亲和性的方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种克服美洲黑杨×中国山杨杂交障碍的方法。

本发明所提供的方法包括如下步骤：

1)按照包括如下步骤的方法处理母本柱头：A)用正己烷的挥发气熏所述母本的雌蕊柱头；B)用所述母本的花粉水提液涂抹经步骤A)处理的所述母本的雌蕊柱头；

2)将雌蕊柱头经过步骤1)所述方法处理的所述母本与作为父本的杨树杂交，得到杂交种；

所述母本为杨属黑杨派杨树；

所述父本为杨属白杨派或山杨亚派杨树；

所述花粉水提液是用水提取所述母本的花粉得到的不含花粉粒的液体(提取液)。

所述花粉水提液制备过程中，所述提取在20-25℃进行。

可按照如下方法用正己烷的挥发气熏所述母本的雌蕊柱头：将雌花序竖直伸入盛有液态正己烷的内径(mm)×长度(mm)为20mm×180mm的试管中，液态正己烷的高度为30-40mm，雌花序的顶端距正己烷液面的垂直距离是90-110mm，用正己烷的挥发气熏雌蕊柱头5～10min。

所述花粉水提液按照包括如下步骤的方法制备：将所述母本的花粉用水提取50-70min后收集不含花粉粒的液体，该液体即为花粉水提液。

所述提取中所述母本的花粉与水的配比为每克所述母本的花粉与20-30ml蒸馏水混合。

所述方法中，所述母本具体可为美洲黑杨(Populus deltoides)；所述步骤A)是在所述母本的雌蕊柱头发亮具有分泌汁液时用正己烷的挥发气熏所述母本的雌蕊柱头。

所述方法中，所述父本具体可为中国山杨(Populus davidiana)。

所述方法具体可为：所述提取的时间为60min、所述母本的花粉与水的配比为每克所述母本的花粉与25ml蒸馏水混合，所述用正己烷的挥发气熏所述母本的雌蕊柱头的时间为8min。

所述方法还可具体为：所述提取的时间为70min、所述母本的花粉与水的配比为每克所述母本的花粉与30ml蒸馏水混合，所述用正己烷的挥发气熏所述母本的雌蕊柱头的时间为10min。

所述方法还可具体为：所述提取的时间为50min、所述母本的花粉与水的配比为每克所述母本的花粉与20ml蒸馏水混合，所述用正己烷的挥发气熏所述母本的雌蕊柱头的时间为5min。